表面等离子谐振（SPR）生物传感器检测药物残留的研究
文献类型：学位论文
| 作者 | 李辉 |
| 学位类别 | 博士 |
| 答辩日期 | 2007-05-24 |
| 授予单位 | 中国科学院电子学研究所 |
| 授予地点 | 电子学研究所 |
| 导师 | 崔大付 |
| 关键词 | 表面等离子谐振 磺胺 抑制 检测限 动力学 |
| 其他题名 | Surface Plasmon Resonance (SPR) Based Biosensor Immunoassays for Drug Residues |
| 中文摘要 | 本研究利用表面等离子谐振（SPR）生物传感器检测药物残留。SPR-2002生物传感器以及高通量、多组份图像SPR生物传感器为中国科学院电子学研究所自行研制，阵列芯片具有3×5型阵列点，通过使用参考表面，非特异性吸附与温度造成的影响可以被去除，从而提高数据的质量。 实验采用抑制法，将小分子药物与牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）的偶联物固定在芯片上，将抗体与不同浓度的磺胺药物混合后流过芯片表面来构建标准曲线。 利用单通道单参数SPR生物传感器对磺胺二甲嘧啶（sulfamethazine, SMZ）、磺胺甲恶唑（sulfamethoxazole, SMOZ） 以及磺胺嘧啶（sulfadiazine, SDZ）的检测方法进行了研究，对抗原在芯片表面的固定条件以及抗体的浓度等反应条件进行了优化，实验中所构建的标准曲线的检测范围为0-10ng/mL，磺胺二甲嘧啶、磺胺甲恶唑的检测限都小于5ng/mL，对磺胺嘧啶的检测可达到0.1ng/mL。对抗体的特异性和稳定性进行了研究。单抗对BSA无结合作用。利用抗体与固相抗原结合的动力学曲线的特性建立了在线性范围内连续检测五次之后再进行洗脱的连续检测方法，并对这种方法进行了评估，缩短了检测的时间，每个样品的检测时间为5分钟。 利用自制的图像阵列SPR生物传感器对缓冲液中的磺胺二甲嘧啶（SMT）与磺胺甲恶唑（SMOZ）进行了检测。两种磺胺药物与牛血清白蛋白（BSA）的偶联物被分别固定于阵列芯片上不同的两列，其余一列作为参照。固定过程在仪器中进行，以便于监控抗原的固定量。实验中所构建的两种磺胺药物的标准曲线的检测范围在0ng/mL-20ng/mL，磺胺二甲嘧啶的检测限为0.6ng/mL，磺胺甲恶唑的检测限为3.5 ng/mL。 初步研究了牛奶基质中蛋白与脂肪对抗体抗原结合的影响。牛奶中的脂肪对抗体抗原的结合具有明显的阻碍作用。未脱脂牛奶中的抗体不能与固定在芯片表面的抗原结合。 对磺胺二甲嘧啶抗体与抗原（SMT-BSA）之间的结合反应进行了动力学分析，得到结合速率常数为Ka=1.38×10000/MS ，解离速率常数为Kd0.0136/S ，亲和常数为1000000/M 。 |
| 语种 | 中文 |
| 公开日期 | 2011-07-19 |
| 页码 | 54000 |
| 源URL | [http://ir.ie.ac.cn/handle/80137/8361]  |
| 专题 | 电子学研究所_电子所博硕士学位论文_电子所博硕士学位论文_学位论文 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 李辉. 表面等离子谐振（SPR）生物传感器检测药物残留的研究[D]. 电子学研究所. 中国科学院电子学研究所. 2007. |
入库方式： OAI收割
来源：电子学研究所
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