树鼩肝细胞体外分离培养体系的复建及主要影响因素分析
文献类型：期刊论文
| 作者 | 张顶1,2; 高丽3; 何有文1; 夏雪山3; 张华堂[*]1; 张远旭1; 孙丽1,2; 冯悦3 |
| 刊名 | 动物学研究
 |
| 出版日期 | 2009 |
| 卷号 | 30期号:1页码:24-30 |
| 关键词 | 树鼩 肝细胞 二甲基亚砜 肝细胞生长因子 表皮生长因子 分化 |
| 其他题名 | Crucial Factors for de novo Establishment of Long-term Primary Culture of Tree Shrew Hepatocytes |
| 通讯作者 | zhanght@post.kiz.ac |
| 中文摘要 | 树鼩(Tupaia Belangeri)与人和灵长类亲缘关系较为接近,是乙型肝炎研究中备受关注的小动物模型,而其原代肝细胞的分离和培养则是建立HBV体外感染模型及应用和基础研究的关键的第一步,但由于以往的文献报道均较为简要,需要较长时间的摸索。本研究通过与机械分离法的直接比较,验证了两步灌注法在树鼩肝细胞分离中的优越性。进而发现,在分离后的体外培养过程中,二甲基亚砜不仅能够促进和维持原代肝细胞的分化,而且能够显著地抑制纤维状细胞群的出现。同时,肝细胞生长因子(HGF)和表皮生长因子(EGF)能够促进肝细胞在体外长期存活。在此优化的条件下,原代培养可持续4—5周,并且较多的细胞聚集形成类似肝窦结构的形态,从而为乙型肝炎病毒感染机理研究和药物筛选提供了必备的先决条件,也为丙型肝炎病毒和丁型肝炎病毒及单纯疱疹病毒等研究和药物筛选提供了可能。 |
| 英文摘要 | Tree shrews （Tupaia Belangeri） are phenogenetically close to humans and primates and generally recognized as a prominent small animal model for studies of heptitis virus type B （HBV）. Isolating and culturing tree shrew hepatocytes is the first key step toward the cellular model of HBV infection in vitro. Due to the lack of details in previous reports, establishing the model has been a matter of arbitary experiences. In this study, we validated the superiority of perfusion over mechanic dispersion for hepatocyte separation and isolation. Subsequent cultures showed that dimethyl sulphoxide （DMSO） could suppress the growth of fibroblast-like cells and maintain the hepatocytes in the differentiated status. Furthermore, hepatocyte growth factor （HGF） and epidermal growth factor （EGF） could sustain growth and survival of the hepatocytes in the long-term culture. The combination of DMSO and HGF/EGF could maintain the hepatocytes in a longer and more stable differentiated status with clear trend to form liver sinus-like structures. Following this detailed method as a laboratory routine would permit plentiful starting material for study of HBV infection in vitro and drug-screening, as well as studies on hepatitis viruses type C and D, and herpes simplex virus. |
| 收录类别 | 其他 |
| 资助信息 | 国家重点基础研究发展计划(973计划)分课题(2007CB512807;云南省科技条件平台建设计划项目(2006PT07-2). |
| 语种 | 中文 |
| 源URL | [http://159.226.149.26:8080/handle/152453/9721]  |
| 专题 | 昆明动物研究所_分子免疫生物学 昆明动物研究所_动物模型与人类重大疾病机理重点实验室 |
| 作者单位 | 1.中国科学院昆明动物研究所 动物模型与人类疾病机理重点实验室, 免疫生物学实验室和人类疾病灵长类动物模型研究团队， 云南 昆明 650223 2.中国科学院研究生院;北京100049 3.昆明理工大学 生物与化学工程学院;云南昆明 650224 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 张顶,高丽,何有文,等. 树鼩肝细胞体外分离培养体系的复建及主要影响因素分析[J]. 动物学研究,2009,30(1):24-30. |
| APA | 张顶.,高丽.,何有文.,夏雪山.,张华堂[*].,...&冯悦.(2009).树鼩肝细胞体外分离培养体系的复建及主要影响因素分析.动物学研究,30(1),24-30. |
| MLA | 张顶,et al."树鼩肝细胞体外分离培养体系的复建及主要影响因素分析".动物学研究 30.1(2009):24-30. |
入库方式： OAI收割
来源：昆明动物研究所
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