HIV-1 C亚型密码子优化gp120基因重组腺病毒载体的构建及表达
文献类型：期刊论文
| 作者 | 白雪1,2; 庞伟1; 王路1,2; 张高红1; 郑永唐[*]1 |
| 刊名 | 医学分子生物学杂志
 |
| 出版日期 | 2009 |
| 卷号 | 6期号:5页码:397-400 |
| 关键词 | HIV-1 密码子优化 gp120基因 腺病毒 载体构建与表达 |
| 其他题名 | Construction of Replication-deficient Recombinant Adenoviral Vector Containing Codon Usage-optimized gp120 Gene of HIV-1 Subtype C and its Expression |
| 通讯作者 | zhengyt@mail.kiz.ac.cn |
| 合作状况 | 其它 |
| 中文摘要 | 目的 构建含有HIV-1 C亚型gp120基因重组腺病毒载体,并在293细胞中表达gp120蛋白.方法 PCR扩增,获得HIV-1 C亚型gp120片段,定向克隆入腺病毒转移载体pTrack-CMV,线性化后转化至含有腺病毒骨架载体pAd-easy-1的大肠埃希菌BJ5183,获得重组子prAd-gp120,PacⅠ酶切纯化后转染293细胞,包装成复制缺陷型重组腺病毒vAd-gp120.结果 经PCR、酶切及DNA测序,插入片段大小、方向正确,获得了具有感染力的vAd-gp120重组腺病毒;通过Western 印迹检测,重组腺病毒在293细胞中表达出分子量为120 kD的蛋白.结论 成功构建了含有HIV-1 C亚型gp120基因重组腺病毒载体,并获得该基因的表达. |
| 英文摘要 | To construct replication—deficient recombinant adenoviruses containing HIV-1 subtype C gpl20 gene and express gpl20 in 293 cells．Methods HIV一1 gpl20 gene frag— ment was obtained by PeR and cloned into the shutde vector pTrack—CMV．and then transformed into E．coli BJ5 1 83 containing adenoviml backbone pAd-easy一1 following linearization at a Pme I site．The resultant recombinant plasmid，named prAd—gpl20，was digested with Pac I and then transfected into packaging cell line 293 cells by USe of Lipofectamin 2000，leading to production of infective replication·deficient recombinant adenoviruses，vAd-gpl20．Results Restriction enzyme digestion and sequencing analysis confirmed correct insertion of HIV一1 subtype C gpl20 gene in pTrack·-CMV vector．Expression of gpl20 in 293 cells was detected by Western Blotting 8．8·— say．Conclusion The replication—deficient recombinant adenoviral vector containing gpl20 wag cotreedy constructed．The obtained vAd—gpl20 was able to express gpl20 protein in 293 cells sufficient— ly． |
| 收录类别 | 其他 |
| 资助信息 | 国家自然科学基金，云南省科技基础条件平台计划，中国科学院知识创新工程重要方向项目，西部之光人才计划 |
| 语种 | 中文 |
| 公开日期 | 2010-08-04 |
| 源URL | [http://159.226.149.42:8088/handle/152453/880]  |
| 专题 | 昆明动物研究所_分子免疫药理学 昆明动物研究所_动物模型与人类重大疾病机理重点实验室 |
| 作者单位 | 1.中国科学院昆明动物研究所动物模型与人类疾病机理重点实验室分子免疫药理学实验室,昆明市650223 2.中国科学院研究生院,北京市100049 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 白雪,庞伟,王路,等. HIV-1 C亚型密码子优化gp120基因重组腺病毒载体的构建及表达[J]. 医学分子生物学杂志,2009,6(5):397-400. |
| APA | 白雪,庞伟,王路,张高红,&郑永唐[*].(2009).HIV-1 C亚型密码子优化gp120基因重组腺病毒载体的构建及表达.医学分子生物学杂志,6(5),397-400. |
| MLA | 白雪,et al."HIV-1 C亚型密码子优化gp120基因重组腺病毒载体的构建及表达".医学分子生物学杂志 6.5(2009):397-400. |
入库方式： OAI收割
来源：昆明动物研究所
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