一种简易的人艾滋病毒( HIV21) 载量测定方法的建立与初步评价
文献类型：期刊论文
| 作者 | 夏雪山1,2; 徐焕兵1; 冯汉平1; 贲昆龙[*]1 |
| 刊名 | 中国免疫学杂志
 |
| 出版日期 | 2003 |
| 卷号 | 19期号:11页码:779-782 |
| 关键词 | HIV-1 病毒载量 外参照 标准曲线 |
| 其他题名 | The establishment and preliminary evaluation of a simple and practical method for the quantitation of HIV-1 load |
| 合作状况 | 其它 |
| 中文摘要 | 目的 :建立一种简易的HIV 1感染者和艾滋病人血浆病毒载量测定的方法。方法 :构建含保守的引物SK14 5 SK4 31扩增靶序列的重组质粒pSPgag737,重组质粒体外转录产物经系列稀释得到HIV 1定量测定的外参照 ,在同样条件下以引物SK14 5 SK4 31对外参照和待测样品进行RT PCR扩增 ,用电泳图谱分析系统分析经EB染色的扩增产物电泳图谱 ,作出外参照的初始加入拷贝数与光强度的标准曲线 ,获得相应的回归方程 ,进而计算出待测样品的HIV 1病毒载量。结果 :重组质粒pSPaga737经酶切和PCR鉴定 ,确认含有引物SK14 5 SK4 31的扩增靶序列 ,用重组质粒体外转录 ,得到了 1～ 10 5copies的 10倍系列稀释的外参照 ,外参照标准曲线有较好的线性关系 (r =0 96 )。该方法的测定范围为 5× 10 2 ～ 5× 10 7拷贝 ml血浆。对 10个样品进行 3次重复测定 ,平均变异系数较小 (CV =2 0 % )。结论 :所建立的HTV 1病毒载量定量测定方法 ,操作简单 ,价格便宜 ,特异性好 ,同时有较好的可重复性。 |
| 英文摘要 | Objective :To develop a simple and practical methodfor the quantitation of plasma HIV 2 1 load in HIV 2 1 infected and AIDS patients. Methods:The recombinant plasmid pSPgag737 containing the target sequence of primers SK145 Π SK431 was constructed. The tran 2 scripted RNA in vitro from recombinant plasmid was serially diluted to obtain the external standard for the quantitation of HIV 2 1 load. All the standards and examined patient samples were amplified with RT 2 PCR USINGprimers SK145 Π SK431. The electrophoresis image with EB stain 2 ingwas analyzed with Kodak Digital Science Electrophoresis Documentation and Analysis System 120(EDAS120) ,and the standard curve of ex 2 ternal standard was calculated. Thereafter , the HIV 2 1 loadsof examined sampleswere computed. Results:The resultsof PCR and restriction en 2 donuclease digestion showed the target sequence of primers SK145 Π SK431 was inserted into the recombinant plasmid pSPgag737. The detectable range of pSPgeg 737 2 transcripted external standard was 10 ～ 10 5 copies per PCR reaction. The correlation coefficient of external standard be 2 tween the input copies and fluorescence intensity was 0 1 96. The higher intra 2 assay reproducibility( CV = 20 %)was demonstrated by triplicate test of 10 patient samples. The HIV 2 1 load which can be detected by this method rangedfrom 5 × 10 2 to 5 × 10 7 copies per ml plasma. Conclu 2 sion :A simple , practical and reproducible methodfor quantitationof HIV 2 1 load was established. It is an useful tool in basic research and clin 2 ical practice on AIDS. |
| 收录类别 | 其他 |
| 资助信息 | 云南省与中国科学院省院合作项目资助(96S004) |
| 语种 | 中文 |
| 公开日期 | 2010-08-12 |
| 源URL | [http://159.226.149.42:8088/handle/152453/1408]  |
| 专题 | 昆明动物研究所_其他 |
| 作者单位 | 1.中国科学院昆明动物研究所,昆明650223 2.中国科学院研究生院,北京100039 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 夏雪山,徐焕兵,冯汉平,等. 一种简易的人艾滋病毒( HIV21) 载量测定方法的建立与初步评价[J]. 中国免疫学杂志,2003,19(11):779-782. |
| APA | 夏雪山,徐焕兵,冯汉平,&贲昆龙[*].(2003).一种简易的人艾滋病毒( HIV21) 载量测定方法的建立与初步评价.中国免疫学杂志,19(11),779-782. |
| MLA | 夏雪山,et al."一种简易的人艾滋病毒( HIV21) 载量测定方法的建立与初步评价".中国免疫学杂志 19.11(2003):779-782. |
入库方式： OAI收割
来源：昆明动物研究所
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