HIV-1整合酶3’端加工抑制剂筛选方法的建立与优化
文献类型：期刊论文
| 作者 | 陆翠林1,2; 张旋1,2; 詹金彪3; 杨柳萌[*]1; 郑永唐[*]1 |
| 刊名 | 中国药理学通报
 |
| 出版日期 | 2014 |
| 卷号 | 30期号:10页码:1469-1473 |
| 关键词 | HIV-1 整合酶 3’端加工 荧光共振能量转移 影响因素 优化 抑制剂 |
| 其他题名 | Establishment and optimization of a method for screening HIV-1 integrase 3′-processing inhibitor |
| 通讯作者 | lmyang@mail.kiz.ac.cn ; zhengyt@mail.kiz.ac.cn |
| 合作状况 | 其它 |
| 中文摘要 | 目的：建立与优化HIV-1整合酶3′端加工抑制剂筛选方法。方法利用荧光共振能量转移原理建立筛选方法,用DNaseⅠ切割底物 DNA确定底物检测波长,在该检测波长下,对缓冲液成分、底物浓度、酶浓度、金属离子浓度等影响整合酶活性的条件进行优化,并用阳性药物雷特格韦和杨梅黄素进行方法验证。结果检测波长为495 nm/525 nm,使用缓冲液1、底物浓度500 nmol·L-1,整合酶浓度1μmol· L-1,镁离子浓度20 mmol · L-1时整合酶3′端加工活性最强。在此反应条件下雷特格韦和杨梅黄素能有效地抑制整合酶3′端加工活性。用所建立的方法筛选到2个有较强抑制整合酶3′端加工活性的抑制剂。结论该文成功建立并优化了HIV-1整合酶3′端加工抑制剂筛选方法。 |
| 英文摘要 | Aim To establish and optimize a method for screening HIV-1 integrase 3′-processing inhibitor. Methods Fluorescence resonance energy transfer （ FRET） was used to create an assay for screening in-tegrase 3′-processing inhibitors; wavelength was de-fined by DNaseⅠ; factors affecting IN activity were optimized, including buffer composition, substrate con-centration, enzyme concentration, metal ion concentra-tion. Results Integrase 3′-processing optimizing reac-tion conditions were buffer 1 , 500 nmol · L-1 sub-strate, 1 μmol·L-1 integrase, 20mmol·L-1 magne-sium ion. Positive drug raltegravir and myricetin could effectively inhibit integrase 3′-processing activity using this assay. Two integrase 3′-processing inhibitors were screened by this method. Conclusion The method for screening HIV-1 integrase 3′-processing inhibitor is successfully established and optimized. |
| 收录类别 | 其他 |
| 资助信息 | 国家自然科学基金资助项目(No 81102483);国家科技部“重大新药创制”重大专项课题(No 2009ZX09501-029,2012ZX10001-006,2013ZX09103001-010). |
| 语种 | 中文 |
| 公开日期 | 2015-01-26 |
| 源URL | [http://159.226.149.42:8088/handle/152453/8234]  |
| 专题 | 昆明动物研究所_分子免疫药理学 昆明动物研究所_动物模型与人类重大疾病机理重点实验室 |
| 作者单位 | 1.中国科学院昆明动物研究所中国科学院和云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室,云南昆明650223 2.中国科学院大学,北京100039 3.浙江大学医学院生物化学系,浙江杭州310058 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 陆翠林,张旋,詹金彪,等. HIV-1整合酶3’端加工抑制剂筛选方法的建立与优化[J]. 中国药理学通报,2014,30(10):1469-1473. |
| APA | 陆翠林,张旋,詹金彪,杨柳萌[*],&郑永唐[*].(2014).HIV-1整合酶3’端加工抑制剂筛选方法的建立与优化.中国药理学通报,30(10),1469-1473. |
| MLA | 陆翠林,et al."HIV-1整合酶3’端加工抑制剂筛选方法的建立与优化".中国药理学通报 30.10(2014):1469-1473. |
入库方式： OAI收割
来源：昆明动物研究所
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