HSV-1在树鼩中裂解感染和潜伏感染的研究
文献类型：学位论文
| 作者 | 杨睿 |
| 学位类别 | 硕士 |
| 答辩日期 | 2014-05 |
| 授予单位 | 中国科学院研究生院 |
| 授予地点 | 北京 |
| 关键词 | 树鼩 潜伏 重激活 单纯疱疹病毒I型 |
| 其他题名 | Lytic and Latent Infection of HSV-1 In Tree Shrew |
| 学位专业 | 生物工程 |
| 中文摘要 | HSV-1是双链DNA病毒，基因组长152kb，含有84个基因。该病毒感染个体分为潜伏感染和裂解感染两类。潜伏感染主要发生在周围神经细胞中，潜伏后病毒复制水平降低，并且不会裂解所感染的神经细胞。目前的BALB/c小鼠感染模型虽然部分满足了对HSV研究的需要，但是其潜伏过程与人类完全不同，而且重激活效果也不理想。 在小鼠模型中，感染的前两周处于急性感染时期；感染两周后，病毒逐渐进入潜伏状态。具体表现在病毒绝大部分基因都停止表达，仅LAT（Latency-associated Transcript）表达。但是病毒并非失去复制和感染的能力。在受到外界刺激的情况下，病毒可以重新激活转录和复制。在此过程中一些和该过程密切相关的基因例如ICP0、ICP4等可以调控病毒基因转录的蛋白是否参与表达就显得至关重要。因此，本文中，HSV-1角膜感染后，利用原位杂交检测三叉神经节（TG）切片在不同时间点上LAT的分布及表达情况；同时还利用实时荧光定量PCR来检测不同感染时间点在TG中LAT和ICP4的含量。实验结果表明在感染后1-28天随着感染天数的增加，ICP4表达下降，LAT 表达上升，证明HSV-1确实可以在树鼩三叉神经节通过角膜感染的方式建立潜伏。本文对角膜冲洗液进行HSV-1特异性PCR和三叉神经节离体培养来确定是否有自发重激活。实验结果表明，树鼩HSV-1潜伏模型的体内自发重激活比率（1.68%），该结果和小鼠模型较为相似。离体培养感染TG发现其重激活比率为78%。这些结果从多个角度证明HSV-1在树鼩体内可以建立潜伏，并且有一定的重激活能力。 关键词：HSV-1，树鼩，潜伏，重激活，LAT，Explant cocultivation |
| 英文摘要 | Herpes Simplex Virus is a double-strand DNA virus. There are two kinds of infection during its life span. One is productive infection and latent infection. HSV-1 establishes life long latency in peripheral neurons with very low level of replication. The latent infected neuron mostly remain intact without going apoptosis. Under stress latency is essential for understanding HSV-1 infection in molecular and clinical level.Current mouse model for HSV-1 latent infection is limited due to poor spontaneous reactivation. Therefore we try to establish latent infection in trigeminal ganglia of Tupaia belangeri. In latent infection HSV-1 transported retrogradely to peripheral neurons. Indeed most viral genes are repressed except for LAT（Latency-Associated Transcript）.However, virus in latency is able to replicate and transcribe again when stress occurs. We tested ICP4 LAT expression by Real-time PCR and detect LAT in TG section by ISH. Because of decrease of ICP4 expression coupled with increase of LAT in course of time before 28dpi（day post infection）.Furthermore, PCR detecting HSV-1 from eye-swab and explantion of latent infected TG in non-NGF medium. Ratio of tree shrew model of spontaneous reactivation and stimulated reactivation are 1.68% and 78% respectively. These data strongly suggest that tree shrew is a usable model for HSV-1 latent infection. Keyword： HSV-1 , Tree shrew, Latency ,LAT ,Reactivation, Explant cocultivation |
| 语种 | 中文 |
| 源URL | [http://159.226.149.26:8080/handle/152453/10204]  |
| 专题 | 昆明动物研究所_基因调控与表达遗传 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 杨睿. HSV-1在树鼩中裂解感染和潜伏感染的研究[D]. 北京. 中国科学院研究生院. 2014. |
入库方式： OAI收割
来源：昆明动物研究所
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