用简并寡核苷酸引物构建人类染色体区带特异性探针池的技术
文献类型：期刊论文
| 作者 | 邓昊1; 王文2; 夏家辉1 |
| 刊名 | 中华医学遗传学杂志
 |
| 出版日期 | 1998 |
| 卷号 | 15期号:3页码:158-160 |
| 关键词 | 显微切割 染色体区带 简并寡核苷酸引物-聚合酶链反应 探针池 |
| ISSN号 | 1003-9406 |
| 中文摘要 | 目的 建立快速有效构建人类染色体区带特异性探针池及其文库的技术。方法 显微切割 人类染色体 3p23- p26, 3q21- q22, 4p12- p16 区带 , 用简并寡核苷酸引物2 PCR ( degenerate oligonucleotied primered 2 PCR,DOP 2 PCR ) 扩增 , 并用荧光原位杂交 ( fluorescence in situ hybridization, F ISH ) 检测扩增产 物来源 , 再将区带特异性扩增产物克隆于 pUC19 载体构建区带特异性文库 , 以及用 Α2 32 PA TP 标记的 gDNA 行菌落原位杂交。结果 经 F ISH 证实 , 3p23- p26, 3q21- q22, 4p12- p16 探针池均在切割相应区带 出现特异性信号。其中 3q21- q22 获得的 1 1 2 × 10 4 个阳性克隆。随机分析 30 个含插入片段的白色菌落 , 其插 入片段平均约 420bp 。 220 个白色克隆菌落原位杂交示单拷贝和低度重复序列占 81% (178 ? 220) 。 结论 改进的显微切割结合 DOP 2 PCR 为人类染色体探针池及文库构建建立了一个简易、高效的方法 , 这将有助 于基因克隆和人类基因的全序列分析。 |
| 收录类别 | 其他 |
| 资助信息 | 国家自然科学基金 |
| 原文出处 | 1998153158.pdf |
| 语种 | 中文 |
| 公开日期 | 2010-08-24 |
| 源URL | [http://159.226.149.42:8088/handle/152453/2445]  |
| 专题 | 昆明动物研究所_基因起源组 |
| 作者单位 | 1.湖南医科大学医学遗传学国家重点实验室 2.中国科学院昆明动物研究所 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 邓昊,王文,夏家辉. 用简并寡核苷酸引物构建人类染色体区带特异性探针池的技术[J]. 中华医学遗传学杂志,1998,15(3):158-160. |
| APA | 邓昊,王文,&夏家辉.(1998).用简并寡核苷酸引物构建人类染色体区带特异性探针池的技术.中华医学遗传学杂志,15(3),158-160. |
| MLA | 邓昊,et al."用简并寡核苷酸引物构建人类染色体区带特异性探针池的技术".中华医学遗传学杂志 15.3(1998):158-160. |
入库方式： OAI收割
来源：昆明动物研究所
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