水葫芦苗ISSR-PCR体系的优化与引物筛选
文献类型:期刊论文
作者 | 王钧; 王建科; 李毅; 胡延萍; 石琳; 王莉 |
刊名 | 分子植物育种
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出版日期 | 2017 |
期号 | 8页码:3145-3152 |
关键词 | 水葫芦苗 ISSR-PCR 正交设计 体系优化 |
中文摘要 | 以改良CTAB法提取水葫芦苗基因组DNA为模板,利用正交设计试验对影响ISSR-PCR反应体系的5个因素(TaqDNA聚合酶,dNTP,引物,模板及Mg~(2+))进行了优化筛选。经极差分析和方差分析,最终建立了水葫芦苗ISSR-PCR的最佳反应体系。结果表明,总体积20μL的反应体系中各因素浓度分别为:TaqDNA聚合酶0.025 U/μL、Mg~(2+)1.5 mmol/L、dNTP 1.0 mmol/L、引物0.5μmol/L、模板DNA 1.5 ng/μL。通过筛选得到10条扩增条带清晰的ISSR引物,并通过梯度PCR确定了各引物的最适退火温度。在此基础上对循环次数进行优化,最终确定最佳循环次数为40次。 |
源URL | [http://ir.nwipb.ac.cn/handle/363003/9886] ![]() |
专题 | 西北高原生物研究所_中国科学院西北高原生物研究所 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 王钧,王建科,李毅,等. 水葫芦苗ISSR-PCR体系的优化与引物筛选[J]. 分子植物育种,2017(8):3145-3152. |
APA | 王钧,王建科,李毅,胡延萍,石琳,&王莉.(2017).水葫芦苗ISSR-PCR体系的优化与引物筛选.分子植物育种(8),3145-3152. |
MLA | 王钧,et al."水葫芦苗ISSR-PCR体系的优化与引物筛选".分子植物育种 .8(2017):3145-3152. |
入库方式: OAI收割
来源:西北高原生物研究所
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