基于磁性肝微粒体生物反应器对几种中药的体外代谢研究
文献类型：学位论文
| 作者 | 薛莹 |
| 答辩日期 | 2014-05 |
| 文献子类 | 博士 |
| 授予单位 | 中国科学院大学 |
| 导师 | 丁立生 ; 廖循 |
| 关键词 | 磁性材料 肝微粒体 生物反应器 中药代谢 黄连 陈皮 前胡 Hplc-uv-ms Uplc-uv-ms Cyp1a2 |
| 学位专业 | 药物化学 |
| 英文摘要 | 目前对于中药的体外代谢研究大多是针对某些特定活性成分的代谢研究。但是由于中药是多组分的复杂混合物，某一种成分的代谢或各成分代谢的叠加都难以体现中药代谢的真实情况。因此有必要对中药提取物的体外整体代谢研究进行探讨。本论文将肝微粒体固定于磁性纳米材料上，构建起磁性肝微粒体生物反应器，应用于中药提取物的体外整体代谢的研究。该反应器具有代谢效率高、方便样品分析的前处理、能够重复使用等优点；再配合HPLC-UV-MS、UPLC-UV-MS等分析手段，在对中药提取物进行整体代谢的研究中表现出很大的优势。 本学位论文主要内容如下： 第一章为磁性肝微粒体生物反应器的制备和表征。通过静电吸附作用将肝微粒体固定于经硅胶表面改性的磁性微球上，获得了以磁性纳米材料为核心的肝微粒体生物反应器，并用透射电镜和傅里叶-红外对其进行表征；采用考马斯亮蓝法测定了肝微粒体的固定化率；选择小檗碱作为底物，比较了未固定和固定肝微粒体的生物活性，并测定了固定化肝微粒体生物反应器的重复利用率。 第二章，磁性肝微粒体生物反应器应用于中药黄连提取物的体外代谢研究。将黄连提取物与该生物反应器共孵化后得到提取物的整体代谢产物，利用磁分离实现生物反应器与反应溶液的分离；运用UPLC-MS/MS分析其反应液，鉴定了一系列反应物（黄连中的固有成分）与代谢产物，发现两个主要代谢产物峰—去亚甲基小檗碱和芬氏唐松草定碱，其中去亚甲基小檗碱是黄连主要成分小檗碱、巴马汀、药根碱、非洲防己碱的共同代谢产物，并提出了黄连提取物整体代谢时各主成分的代谢途径。 第三章，磁性肝微粒体生物反应器应用于中药陈皮提取物的体外代谢研究。运用UPLC-MS/MS从其反应液中鉴定了一系列反应物与代谢产物，发现六个代谢产物峰，主要为陈皮的主要成分—陈皮素和桔红素的脱甲氧基化合物和羟基化化合物，其中有一个代谢产物—3’-羟基桔红素，为首次从桔红素的代谢产物中发现。这一现象说明桔红素的代谢产物—3’-羟基-5,6,7,8,4’-五甲氧基黄酮的生成途径，不仅仅是由4’-脱甲基桔红素羟基化而来，还可能是从3’-羟基桔红素脱甲基而形成，从而提出桔红素的一条新的代谢途径。 第四章，磁性肝微粒体生物反应器应用于中药前胡提取物的体外代谢研究，并用人血清蛋白（HSA）功能化的磁性纳米材料对代谢前后的反应液进行“配体垂钓”研究。首先，将前胡提取物与磁性肝微粒体生物反应器共孵化后，通过HPLC-UV-ESI-MS/MS比较，我们发现在体外主要是白花前胡甲素、白花前胡乙素和白花前胡素E发生了代谢，共检测到7个代谢峰，与其主要成分白花前胡甲素、白花前胡乙素和白花前胡素E的主要代谢产物一致。然后，将人血清蛋白（HSA）功能化的磁性纳米材料对前胡提取物代谢前后的反应液进行“垂钓”，结果显示，“垂钓”出的都是反应物，说明可能的活性成分是反应物而不是代谢产物。 第五章，芹菜素、柚皮素和山奈酚与CYP 1A2酶的分子对接研究。芹菜素、柚皮素和山奈酚分别属于黄酮、二氢黄酮和黄酮醇类化合物，与肝微粒体代谢的反应速率相差甚大，文献报道参与其代谢的主要亚型酶为CYP 1A2。选择CYP 1A2酶与其进行分子对接研究，模拟结果与实验结果一致。各化合物与酶的自由结合能和空间位阻顺序为：芹菜素>柚皮素>山奈酚，与实验结果一致。 第六章，综述了中药代谢研究的发展现状。 |
| 学科主题 | 天然产物研究 |
| 语种 | 中文 |
| 产权排序 | 1 |
| 源URL | [http://210.75.237.14/handle/351003/28793]  |
| 专题 | 成都生物研究所_天然产物研究 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 薛莹. 基于磁性肝微粒体生物反应器对几种中药的体外代谢研究[D]. 中国科学院大学. 2014. |
入库方式： OAI收割
来源：成都生物研究所
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