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深海热液区管状蠕虫两个C型凝集素的克隆鉴定与功能研究

文献类型:学位论文

作者金倩文
答辩日期2018-05-11
文献子类硕士
授予单位中国科学院大学
授予地点中国科学院海洋研究所
导师孙黎
关键词c 型凝集素,管状蠕虫,深海热液,抑菌作用
英文摘要

C 型凝集素(C-type lectin)是一种能够识别并结合糖的蛋白,具有多种生物活性,如介导细胞间的相互作用,参与信号转导,并在病原体识别与先天免疫过程中发挥重要作用等。管状蠕虫(tubeworm)是许多深海热液区的代表性物种之一,目前关于其免疫系统的研究很少。为探索深海热液管状蠕虫天然免疫系统的特征与功能,本论文针对来自马努斯海盆深海热液的管状蠕虫,研究了其 C 型凝集素的功能与性质。

通过“科学号”马努斯热液航次,我们采集到了热液管状蠕虫 Alaysia sp.样
品,克隆得到了两个 C 型凝集素基因( Lec1 和 Lec2)。序列分析表明 Lec1 和 Lec2 具有典型的 C 型凝集素结构域, 但两者的序列相似性非常低(30.6%),并且它们与已知的其他 C 型凝集素序列同源性也非常低(10.8%–20.4%)。为研究 Lec1 和 Lec2 的功能,我们在大肠杆菌中表达了这两个凝集素的重组蛋白(rLec1与 rLec2),分析了重组蛋白的凝血能力及对深海和近海微生物的作用特点。为了获得深海来源细菌用于本研究,我们分离鉴定了 5 株来自管状蠕虫 Alaysia sp.生存环境中的可培养细菌,其中一株细菌是潜在的新菌,经多相分类学方法研究表明该菌是 Alteromonas 属的一个新种,命名为 Alteromonas oceani sp. nov.(type strain S35T=KCTC 52449T=CGMCC 1.16029T)。随后的实验表明,rLec1与rLec2能广泛结合来自非深海环境及深海环境的细菌,后者包括 Alteromonas oceani sp. nov.,但两个凝集素对不同的细菌具有不同程度的亲和力;rLec1与rLec2结合细菌的活性在 4°C最高,并随着温度的升高活性会降低;rLec1可以在不添加 Ca2+的情况下凝集细菌,但 rLec2不能凝集任何检测的细菌;此外,rLec1 与rLec2都能够抑制海豚链球菌的生长;凝血实验结果表明,在添加 Ca2+的情况下,rLec1与rLec2均能凝集兔、鱼和鸡的血细胞。这些结果是对深海管状蠕虫Alaysia sp.的 C 型凝集素功能的首次探索。

 

语种中文
源URL[http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/154424]  
专题中国科学院海洋研究所
推荐引用方式
GB/T 7714
金倩文. 深海热液区管状蠕虫两个C型凝集素的克隆鉴定与功能研究[D]. 中国科学院海洋研究所. 中国科学院大学. 2018.

入库方式: OAI收割

来源:海洋研究所

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