两步连续离子交换制备色谱分离纯化聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子
文献类型:期刊论文
作者 | 陈婷,贠强,闭静秀,马光辉,苏志国 |
刊名 | 生物工程学报
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出版日期 | 2005 |
期号 | 02页码:284-288 |
关键词 | 聚乙二醇 重组人粒细胞集落刺激因子 蛋白质聚乙二醇化 离子交换色谱 |
英文摘要 | 建立了两步连续离子交换制备色谱分离、纯化聚乙二醇与重组人粒细胞集落刺激因子 (Recombinanthumangranulocytestimulatingfactor,rhG_CSF)偶联物的方法。首先用阳离子交换色谱将偶联蛋白质和非偶联蛋白质分开 ,然后使用阴离子交换色谱去除过量的游离聚乙二醇杂质 ,并分离纯化偶联蛋白异构体分别得到单聚乙二醇化、双聚乙二醇化和三聚乙二醇化的rhG_CSF。它们经十二烷基磺酸钠_聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS_PAGE)分析均为单带。采用基质辅助激光解吸离子化_飞行时间质谱(MALDI_TOF)分析三种偶联蛋白质的分子量 ,分别为 2 3 8kD、2 8 6kD、33 8kD。用噻唑蓝 (MTT)比色法 ,以粒细胞集落刺激因子的依赖细胞株NFS_6 0为靶细胞 ,测定重组人粒细胞集落刺激因子及其与聚乙二醇的偶联物的体外细胞生物学活性 ,单聚乙二醇化、双聚乙二醇化和三聚乙二醇化的rhG_CSF体外活性保留率分别为 92 %、75 %、4 3%。 |
源URL | [http://ir.ipe.ac.cn/handle/122111/25205] ![]() |
专题 | 中国科学院过程工程研究所 |
作者单位 | 北京科技大学土木与环境工程学院,中国科学院过程工程所生化工程国家重点实验室,中国科学院过程工程所生化工程国家重点实验室,中国科学院过程工程所生化工程国家重点实验室,中国科学院过程工程所生化工程国家重点实验室 北京100083中国科学院过程工程所生化工程国家重点实验室,北京100080 ,北京100080 ,北京100080 ,北京100080 ,北京100080 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 陈婷,贠强,闭静秀,马光辉,苏志国. 两步连续离子交换制备色谱分离纯化聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子[J]. 生物工程学报,2005(02):284-288. |
APA | 陈婷,贠强,闭静秀,马光辉,苏志国.(2005).两步连续离子交换制备色谱分离纯化聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子.生物工程学报(02),284-288. |
MLA | 陈婷,贠强,闭静秀,马光辉,苏志国."两步连续离子交换制备色谱分离纯化聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子".生物工程学报 .02(2005):284-288. |
入库方式: OAI收割
来源:过程工程研究所
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