H3K9甲基化及AP-1家族成员对多能性网络的调控机制研究
文献类型：学位论文
| 作者 | 彭天然 |
| 答辩日期 | 2014-03-01 |
| 文献子类 | 硕士 |
| 授予单位 | 中国科学院研究生院 |
| 授予地点 | 广州生物院 |
| 导师 | 裴端卿 |
| 关键词 | 重编程 多能性网络 表观遗传修饰 AP-1家族 |
| 学位名称 | 工程硕士 |
| 学位专业 | 生物工程 |
| 其他题名 | The mechanism study of the pluripotent network regulation regulated by H3K9methylation and AP-1 family members |
| 英文摘要 | 多能性是指干细胞具有分化为三胚层细胞的潜能，多能性干细胞可广泛应用于疾病模型建立、药物筛选和再生医学等领域，具有十分重要的临床应用价值，然而要实现多能性干细胞的最终应用，需要对发生机制有更详尽的了解。本文首先以pre-iPS为实验对象，在含血清和无血清的iPS诱导平台上，通过免疫共沉淀等实验方法，找到胞外信号BMP与抗坏血酸（Vc）与胞内信号的相互作用点，最终发现H3K9甲基化是阻止pre-iPS细胞完全重编程为iPS细胞的关键因素，详细阐述了表观遗传学调控对多能性网络重建的影响。接着从转录因子的角度，通过功能缺失和功能获得手段，详细研究了AP-1转录因子家族成员对多能性网络重建和维持的影响。发现AP-1家族核心成员Jun敲除后对多能性细胞的自我更新与多能性没有影响，但是会导致体细胞失去增殖能力；在重编程体系中过表达Jun能够将重编程效率抑制到0。在Jun低表达的mES细胞中诱导Jun过表达则会导致mES细胞迅速分化，伴随着多能性因子的下调和内胚层分化marker的上调。通过构建Jun的截短型发现，JunDN与AP-1家族另一成员JDP2能够促进重编程效率甚至替代Oct4实现重编程。本文接着通过高通量测序手段mRNAseq和ChIPseq寻找下游机制。测序结果分析显示Jun能够通过直接结合并调控多能性基因和上皮间充质转化调控基因从而影响多能性网络的建立与稳定；而对重编程过程中样品的分析显示，JunDN和JDP2与Oct4共同调控多达1100个下游基因，为进一步阐明Oct4替代重编程的机制打下了基础。本文一方面从表观遗传修饰角度，采取免疫共沉淀等技术手段，阐明了胞外信号BMP和Vc影响重编程的机制。另一方面从转录因子的角度，采取TALEN同源重组构建敲出细胞系等技术手段首次对AP-1家族成员对多能性的调控进行了研究，并通过建立先进的ChIPseq测序平台等高通量测序手段阐明了部分机制。研究结果对于进一步了解多能性网络调控机制和促进临床应用有着重要意义。 |
| 学科主题 | 生物工程 |
| 语种 | 中文 |
| 页码 | 63 |
| 源URL | [http://ir.foo.ac.cn/handle/2SETSVCV/1027]  |
| 专题 | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 |
| 作者单位 | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 彭天然. H3K9甲基化及AP-1家族成员对多能性网络的调控机制研究[D]. 广州生物院. 中国科学院研究生院. 2014. |
入库方式： OAI收割
来源：广州生物医药与健康研究院
浏览0
下载0
收藏0
其他版本
除非特别说明，本系统中所有内容都受版权保护，并保留所有权利。