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HDACi和咖啡因对猪体细胞核移植效率影响的研究

文献类型:学位论文

作者易小玲
答辩日期2014-05-01
文献子类硕士
授予单位中国科学院研究生院
授予地点广州生物院
导师赖良学
关键词 体细胞核移植 HDACi scriptaid 咖啡因
学位名称工程硕士
学位专业生物工程
其他题名Effect of HDACi and caffeine on somatic cell nuclear transfer efficiency in pig
英文摘要克隆猪在农业和生物医学领域都具有十分重要的地位。目前,体细胞核移植技术是获得克隆猪模型的主要技术方法。但是目前克隆猪效率低下,其主要原因之一可能是核移植胚胎表观遗传重编程存在缺陷。有研究报道组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors,HDACi)和咖啡因可提高羊和小鼠核移植效率。本论文将系统地研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂和咖啡因在不同作用浓度、时间及阶段对猪核移植效率的影响,来提高猪核移植效率。 在论文的第一个部分,本文用suberoylanilide hydroxamic acid(SAHA)、oxamflatin、scriptaid这三种组蛋白去乙酰化酶抑制剂,在核移植胚胎的体外培养阶段对重构胚胎进行处理,通过设置不同的处理浓度和处理时间,发现用100 nM scriptaid处理24 h,胚胎囊胚率显著提高(35.5% vs 18.4%,p<0.01),胚胎移植后受体猪怀孕到期率也有所提高(71.4% vs 40%);而suberoylanilide hydroxamic acid(SAHA)、oxamflatin这两种抑制剂均不能够提高猪核移植效率。在论文的第二部分,本文在猪体细胞核移植的不同阶段对卵母细胞和重构胚胎分别进行咖啡因处理,发现在核移植阶段使用1.75 mM咖啡因处理,胚胎囊胚率显著提高(32.5% vs 19%,p<0.01),囊胚平均细胞数也有所提高(32.0±3.4 vs 26.1±1.7,p<0.05)。最后本文尝试将咖啡因处理和scriptaid联合处理来进一步提高猪核移植效率,但发现组合处理后囊胚率低于咖啡因和scriptaid单独处理。 本研究结果证明了组蛋白去乙酰化抑制剂scriptaid和咖啡因能够显著提高猪核移植效率,并确定了scriptaid和咖啡因的最佳处理条件。研究成果对优化猪核体细胞移植体系、提高猪核移植效率提供了有用的数据。
学科主题生物工程
语种中文
页码57
源URL[http://ir.foo.ac.cn/handle/2SETSVCV/1028]  
专题中国科学院广州生物医药与健康研究院
作者单位中国科学院广州生物医药与健康研究院
推荐引用方式
GB/T 7714
易小玲. HDACi和咖啡因对猪体细胞核移植效率影响的研究[D]. 广州生物院. 中国科学院研究生院. 2014.

入库方式: OAI收割

来源:广州生物医药与健康研究院

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