用反义RNA与RNA干扰技术抗草鱼出血病的初步研究
文献类型：学位论文
| 作者 | 廖莎 |
| 学位类别 | 硕士 |
| 答辩日期 | 2008-06-16 |
| 授予单位 | 中国科学院水生生物研究所 |
| 授予地点 | 水生生物研究所 |
| 导师 | 朱作言 |
| 关键词 | RNA干扰 反义RNA shRNA 草鱼出血病 表达抑制 转基因育种 |
| 其他题名 | Study of Disease Resistant on Grass Carp Reovirus by Antisense RNA and RNA Interference(RNAi) |
| 中文摘要 | 转基因技术是20世纪80年代发展起来的一项重要技术，通过向受精卵或早期胚胎中导入外源DNA,能有目的地对生物的遗传物质基础进行修饰，改造，培养出新的品系。鱼类转基因研究的一个重要方向就是定向育种，即通过转基因改良生产性状，如快速生长，抗病虫害，抗冻，抗盐碱等。随着RNA干扰现象的发现与反义技术的出现，人们已将RNAi与反义技术发展成为重要的基因治疗的新手段。 本研究利用RNAi与反义技术，以草鱼出血病为模型，稀有鮈鲫为模式动物，针对草鱼出血病病毒（GCRV）外壳蛋白VP7序列的cDNA片段构建shRNA表达载体pH1-siGCRV-pZero及反义载体pCAVP7c antisense，采用显微注射方法，将外源基因导入稀有鮈鲫受精卵，获得P0代转基因稀有鮈鲫。对培养至性成熟的P0代转基因稀有鮈鲫进行了攻毒实验，通过对攻毒后死亡时间的统计和转植基因表达的检测，得出以下结果：①转shRNA表达载体的稀有鮈鲫死亡率明显低于对照组，至攻毒后第20天死亡率仅有30％，而对照组在攻毒后第12天死亡率均达到100％；②反义组转基因稀有鮈鲫与对照组在死亡率上没有显著差异，但从死亡趋势线上可以看出反义组死亡峰值明显滞后于对照组，相差约18h，死亡峰值滞后与转植基因的表达相关。由此可以得出，不论是RNAi还是反义技术均能有效的抑制病毒的繁殖，具有一定的抗病效果。 |
| 语种 | 中文 |
| 公开日期 | 2010-11-16 |
| 页码 | 64 |
| 源URL | [http://ir.ihb.ac.cn/handle/342005/12076]  |
| 专题 | 水生生物研究所_中科院水生所知识产出（2009年前）_学位论文 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 廖莎. 用反义RNA与RNA干扰技术抗草鱼出血病的初步研究[D]. 水生生物研究所. 中国科学院水生生物研究所. 2008. |
入库方式： OAI收割
来源：水生生物研究所
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