鲫鱼IFN系统基因TLR3和IRF1的克隆鉴定及功能分析
文献类型：学位论文
| 作者 | 史燕 |
| 学位类别 | 博士 |
| 答辩日期 | 2007-06-16 |
| 授予单位 | 中国科学院水生生物研究所 |
| 授予地点 | 水生生物研究所 |
| 导师 | 桂建芳 |
| 关键词 | 鲫鱼囊胚细胞 草鱼出血病病毒 IFN系统 TLR3基因 IRF1基因 诱导表达 细胞定位 核定位信号 功能分析 信号通路 抗病毒机制 |
| 其他题名 | Molecular cloning and functional characterization of interferon system genes TLR3 and IRF1 in Crucian Carp (Carassius auratus L.) |
| 中文摘要 | 本论文对IFN系统两个重要基因TLR3和IRF1进行了克隆鉴定、诱导表达和初步功能分析。TLR3是识别dsRNA的重要免疫识别受体。CaTLR3基因全长cDNA 3312bp，编码904aa。CaTLR3具有同源TLR3蛋白的基本结构，与斑马鱼的TLR3同源性最高。利用病毒及polyI:C处理CAB细胞，CaTLR3基因的表达均有所增强；但表达模式不同。CaTLR3基因广泛分布于健康鲫鱼的各种组织，而在病毒感染的鲫鱼头肾组织中有明显的表达上调。CaTLR3基因可以激活NF-κB，从而启动与NF-κB相连的荧光素酶报告基因的表达。IRF1是与type I IFN的表达调控相关的转录因子之一。CaIRF1基因全长cDNA 1450bp，编码289aa。基因组结构包括8个外显子和7个内含子，全长1.57kb。CaIRF1基因具有广泛的组成型表达，在病毒和polyI:C等诱导下，体外和体内均呈现表达上调。CaIRF1是一个典型的核定位蛋白，存在两个核定位信号（NLS）。其中一个与哺乳类IRF1的NLS一致，位于CaIRF1序列117-146aa；另一个新的NLS在DBD结构域内73-115aa。过量表达CaIRF1的细胞具有一定的抗病毒作用和细胞凋亡相关功能。在筛选的稳定表达CaIRF1的细胞中，IFN基因的组成型表达有所增强，诱导后IFN系统相关基因STAT1和IFI58的表达也显著增强。本论文的研究结果表明鱼类存在通过TLR3识别dsRNA激活NF-κB，诱导IFN表达的信号通路。同时，鱼类IRF1可以通过调节IFN基因和ISG基因的表达，调控细胞抗病毒状态的形成，但调控机制可能比哺乳类更复杂。 |
| 语种 | 中文 |
| 公开日期 | 2010-11-16 |
| 页码 | 144 |
| 源URL | [http://ir.ihb.ac.cn/handle/342005/12146]  |
| 专题 | 水生生物研究所_中科院水生所知识产出（2009年前）_学位论文 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 史燕. 鲫鱼IFN系统基因TLR3和IRF1的克隆鉴定及功能分析[D]. 水生生物研究所. 中国科学院水生生物研究所. 2007. |
入库方式： OAI收割
来源：水生生物研究所
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