赤点石斑鱼卵型芳香化酶基因的表达特征及其启动子功能分析
文献类型:学位论文
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作者 | 黄伟 |
学位类别 | 博士 |
答辩日期 | 2009-05-31 |
授予单位 | 中国科学院水生生物研究所 |
授予地点 | 水生生物研究所 |
导师 | 桂建芳 |
关键词 | 卵型芳香化酶基因 赤点石斑鱼 启动子 性反转 |
其他题名 | Expression pattern and promoter function analysis of ovarian aromatase in red-spotted grouper Epinephelus akaara |
中文摘要 | 本研究在实验室前期工作的基础上,从赤点石斑鱼卵巢SMART cDNA文库中克隆了卵型芳香化酶基因(EaCyp19a1a),并制备了特异性多克隆抗体,对其在成鱼体内的表达特征和调控机制进行了研究。 研究发现,EaCyp19a1a基因具有芳香化酶共有的保守区域,在进化中高度保守。其序列与鱼类卵型芳香化酶之间的同源性较高,并且存在一些特异保守的氨基酸残基。 实验检测发现,EaCyp19a1a在赤点石斑鱼成体卵巢组织中特异表达,且仅表达于卵巢滤泡细胞中。在人工性反转过程中,EaCyp19a1a表达量随着性腺由雌到雄的转变逐渐下降,在雄性精巢组织中检测不到表达。 克隆了EaCyp19a1a基因的启动子区域。序列分析发现,其上有包括SF-1、CREB、SOX5等在内的27个潜在转录因子结合位点。体外活性分析实验表明,在-1010到-898片段中的CREB转录因子对其启动子活性增强具有非常重要的顺势调控作用。显微注射实验发现EaCyp19a1a启动子能够指导绿色荧光蛋白在斑马鱼早期性腺中特异表达,这表明其序列中含有调控性腺特异表达的顺势作用元件,对EaCyp19a1a卵巢特异表达有调控作用。 同时,本研究还发现部分硬骨鱼类Cyp19a1a基因启动子近端有一段长约300bp的高度保守区域,部分转录因子结合位点如TATA框、SF-1、SOX5和CREB等也在该区域保守存在,推测该区域对鱼类Cyp19a1a卵巢特异表达具有重要意义。 |
语种 | 中文 |
公开日期 | 2010-11-16 |
页码 | 116 |
源URL | [http://ir.ihb.ac.cn/handle/342005/12420] ![]() |
专题 | 水生生物研究所_中科院水生所知识产出(2009年前)_学位论文 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 黄伟. 赤点石斑鱼卵型芳香化酶基因的表达特征及其启动子功能分析, Expression pattern and promoter function analysis of ovarian aromatase in red-spotted grouper Epinephelus akaara[D]. 水生生物研究所. 中国科学院水生生物研究所. 2009. |
入库方式: OAI收割
来源:水生生物研究所
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