中华鲟Acipenser sinensis吻端和性腺细胞系的生物学特性
文献类型：学位论文
| 作者 | 叶湘辉 |
| 学位类别 | 硕士 |
| 答辩日期 | 2000 |
| 授予单位 | 中国科学院水生生物研究所 |
| 授予地点 | 中国科学院水生生物研究所 |
| 导师 | 刘汉勤 |
| 关键词 | 中华鲟Acipenser sinensis 组织培养 生物学特性 染色体 |
| 学位专业 | 水生生物学 |
| 中文摘要 | 本篇硕士论文可分为两部分：前半部分为综述部分，总结了鲟鱼类的资源概况以及鲟鱼类体细胞和分子遗传学研究的概况，并对体细胞遗传学领域若干重要技术的应用情况进行了文献综述。后半部分是实验部分，以中华鲟Acipenser sinensis为材料进行了组织培养，并对所建立的细胞系的部分生物学特性进行了鉴定，还尝试用RAPD技术检测不同代数培养细胞相对于来源个体的遗传相似性和变异程度。实验中，在无菌条件下分别取1龄中华鲟的尾鳍、吻端、皮肤、肌肉、肝脏、肠、性腺、肾等八种组织，采用组织块贴壁法，使用含20％的小牛血清的TC199培养基，在27℃下进行体外原代培养，并在传代培养过程中逐渐降低血清浓度至10％。得到来源于吻端和性腺组织的两个细胞系，分别命名为CSSn和CSG。CSSn和CSG均以成纤维样细胞为主。细胞生长较慢，CGS接种9天后、CSSn接种14天后数目才达到最高值，并且数量仅为原来接种时的2倍左右。用草鱼出血病病毒GCHV和甲鱼虹彩病毒STIV感染后，细胞大量脱落和死亡。生长温度范围和最适pH的实验表明，CSG在16～30℃生长正常，最佳生长温度在27℃附近，最适pH为7.2。对第9代CSG和第31代CSSn的染色体进行了分析。CSSn和CSG均含有微染色体（含有微染色体是鲟形目染色体的重要特点）。这两株中华鲟培养细胞的染色体数目众多，在分布上的偏离正常2n值，数目变动范围很大，呈现出“双峰多态”的特点：数目分布范围广，众数区间为两个。第9代CSG的染色体分布的中心趋向落在222～234和248～260之间，各占计数细胞总数的20.2%。第31代CSSn在196～208区间内出现率最高，为23.5%；其次是在170～182区间，出现率15.3%。研究显示这两种培养细胞己属异倍体。大多数细胞染色体数低于正常2n值（264）。提取第13、25、28和34代CSG和DNA以及提供该组织的中华鲟的肌肉DNA，用RAPD技术进行相似性分析。通过统计分析发现随着在体外培养时间的增长，细胞DNA变异程度加大，与来源个体的DNA相似性降低，提示体外环境具有一定的选择压力。结合染色体数目分析来看，染色体丢失和DNA水平上的变异，表征了细胞的异倍化进程，使细胞向着适应体外培养环境的方向转化。 |
| 语种 | 中文 |
| 公开日期 | 2010-11-16 |
| 页码 | 41 |
| 源URL | [http://ir.ihb.ac.cn/handle/342005/12558]  |
| 专题 | 水生生物研究所_中科院水生所知识产出（2009年前）_学位论文 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 叶湘辉. 中华鲟Acipenser sinensis吻端和性腺细胞系的生物学特性[D]. 中国科学院水生生物研究所. 中国科学院水生生物研究所. 2000. |
入库方式： OAI收割
来源：水生生物研究所
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