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高赖氨酸蛋白基因的克隆及其转基因水稻植株的获得

文献类型:学位论文

作者高越峰
答辩日期2000
文献子类硕士
授予单位中国科学院植物研究所
导师荆玉祥 ; 田世平
关键词水稻转化 品质改良 高赖氨酸蛋白基因 基因枪 赖氨酸分析
学位专业植物细胞生物学
其他题名Molecular Cloning of Lysine-Rich Protein Gene and Obtaining of transgenic Rice Plants
英文摘要水稻、玉米、小麦和大麦等许多主要禾本科作物的第一限制性氨基酸是赖氨酸。本文将一个来源于四棱豆的高赖氨酸蛋白基因导入水稻,以研究通过转基因改善蛋白质的可能,获得有经济价值和社会意义的转基因作物。 构建了含有高赖氨酸蛋白基因(Lys)、gus基因及植物选择标记潮霉素磷酸转移酶基因(hpt)的植物表达载体pBRLys;在pBRLys中,该高赖氨酸蛋白基因由目前已知最强的单子叶植物启动子玉米Ubiquitin 1启动子调控。用基因枪轰击法将pBRLys导入水稻幼胚或幼胚诱导的愈伤组织。共得到36株潮霉素抗性再生植株,经分子检测有22株为转基因植株。 实验中对影响水稻转化、再生和移栽一些条件进行了研究。从潮霉素筛选浓度、愈伤组织干燥处理、光照对分化的影响、多效唑的影响和移栽环境等做了一些简化和改善。 PCR检测、PCR-Southern杂交和Southern杂交表明潮霉素基因和Lys基因已经整合到转基因水稻的基因组中,外源基因在转基因水稻基因组中以1个拷贝以上的形式存在。同时,GUS组织化学染色表明转基因水稻植株的叶、茎和根中都有gus基因的表达。 初步对5株转基因植株进行赖氨酸含量测定,结果表明:与非转化对照相比,有两棵植株赖氨酸含量提高,分别增加6.0%和12.4%。对更多抗性转化植株的分子检测、GUS分析和赖氨酸含量测定正在进行之中。
语种中文
页码66
源URL[http://ir.ibcas.ac.cn/handle/2S10CLM1/13973]  
专题中科院植物分子生理学重点实验室
作者单位中国科学院植物研究所
推荐引用方式
GB/T 7714
高越峰. 高赖氨酸蛋白基因的克隆及其转基因水稻植株的获得[D]. 中国科学院植物研究所. 2000.

入库方式: OAI收割

来源:植物研究所

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