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齿肋赤藓AP2/ERF转录因子家族基因Scsoloist的克隆与功能分析

文献类型:学位论文

作者李士敏
答辩日期2016
文献子类硕士
授予单位中国科学院大学
授予地点北京
导师张道远
关键词Ap2/erf转录因子 Scsoloist基因 齿肋赤藓 胁迫抗性
学位专业生物工程
英文摘要植物为了适应环境,进化出了一系列的抗逆机制,而转录因子在其中起到非常重要的作用。AP2/ERF作为植物特有的转录因子参与了植物的抗胁迫信号途径,引起了众多的关注。但是对AP2/ERF转录因子的研究主要集中在DREB,ERF,RAV以及AP2亚家族,而对Soloist亚族报道极少。仅两篇文献报道Soloist亚族基因不仅参与了非生物胁迫还参与了生物胁迫的调控。为了更深入的了解Soloist亚族基因的功能,本研究克隆得到了极端耐干藓类植物齿肋赤藓(Syntrichia caninervis)的Soloist亚族基因Scsoloist及其上游启动子,并进行了生物信息学分析,同时对Scsoloist基因进行了表达模式、亚细胞定位、自激活活性分析,以及酵母和拟南芥的抗性分析。主要结果如下: 1、Scsoloist基因及其启动子的克隆与生物信息学分析:Scsoloist基因gDNA全长为955 bp,cDNA全长为561 bp,具有6个外显子和5个内含子;具有典型的AP2结构域;N端具有核定位信号肽,且定位于细胞核中;只与小立碗藓的亲缘关系较近,而与其它物种都较远;克隆得到Scsoloist基因上游1676 bp的核苷酸序列,预测发现了与抗逆性相关的以及一些新的作用元件。 2、Scsoloist基因在不同处理的表达模式:在复水条件下,Scsoloist基因随着处理时间的延长,表达量增加;在干旱和冷胁迫下,Scsoloist基因表达量先升高后下降;在SA和盐胁迫下Scsoloist基因表达量波动较大;在ABA处理下,Scsoloist基因在24 h出现表达高峰,随后恢复到正常水平。 3、亚细胞定位及自激活活性分析:通过基因枪轰击洋葱表皮细胞的方法证明ScSOLOIST蛋白定位于细胞核。酵母体系的激活实验证明,无论是Scsoloist基因整个片段还是截短后的系列基因片段(P1-P5),都没有表现出自激活活性,表明Scsoloist基因不具有转录激活域。 4、Scsoloist基因抗性功能分析:转Scsoloist基因酵母在渗透,盐,冷以及热胁迫下的长势与对照酵母长势相当,无显著差异。转Scsoloist基因拟南芥与野生型相比不具有抗盐胁迫的能力,但具有明显的对棉花黄萎病病菌大丽轮枝菌的抗性。
学科主题生物工程
语种中文
源URL[http://ir.xjlas.org/handle/365004/14695]  
专题新疆生态与地理研究所_研究系统_荒漠环境研究室
作者单位中科院新疆生态与地理研究所
推荐引用方式
GB/T 7714
李士敏. 齿肋赤藓AP2/ERF转录因子家族基因Scsoloist的克隆与功能分析[D]. 北京. 中国科学院大学. 2016.

入库方式: OAI收割

来源:新疆生态与地理研究所

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