海带CRY-DASH基因的cDNA序列分离和表达分析
文献类型：学位论文
| 作者 | 李璐1,2
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| 答辩日期 | 2017-05-20 |
| 文献子类 | 硕士 |
| 授予单位 | 中国科学院大学 |
| 授予地点 | 北京 |
| 导师 | 段德麟 |
| 关键词 | 蓝光 海带 孢子体 Cry-dash 昼夜节律 |
| 学位专业 | 海洋生物学 |
| 英文摘要 | 蓝光是能在海水中传播的主要光波，对潮下带生活的海带的生长发育起重要作用。隐花色素/光裂解酶家族（Cryptochrome/Photolyase Family, CPF）是一类广泛存在的能被蓝光诱导激活的蛋白家族，CRY-DASH是该家族的一类新成员，已知其能修复ssDNA和dsDNA环形结构中嘧啶酮二聚体损伤，但对其它功能了解较少。 本研究利用cDNA末端快速克隆（RACE）技术，获得海带CRY-DASH基因（SjCRY-DASH）全长序列，结构分析发现，其ORF区长1779 bp，编码592个氨基酸。进行氨基酸同源序列比对，其与其它藻类和高等植物间存在两个重要辅基MTHF和FAD结合的保守域。三维结构预测表明，SjCRY-DASH与目前已解析的CPF家族其他成员晶体结构的相似度较高。通过选择两种原核表达载体（pColdⅠ和pMAL-c5X），对SjCRY-DASH的ORF区进行体外表达及纯化，均得到纯度较高的蛋白。 通过不同光质处理海带幼孢子体，发现蓝光和白光诱导1 h，SjCRY-DASH转录水平均上升，且SjCRY-DASH对蓝光的响应更强烈，而红光对SjCRY-DASH无明显诱导效应。将海带幼孢子体培养于不同日长条件下，SjCRY-DASH转录变化均维持24 h的周期性，且在长、短日照培养下转录起始位点发生改变，表明其与昼夜节律调控密切相关。此外，SjCRY-DASH转录水平在不同温度处理下的节律变化具有温度补偿性。本研究相关结果对了解海带中的CRY-DASH功能具有重要意义，也对探讨海带生长发育受光、温调控的分子机制提供理论依据。 |
| 学科主题 | 地球科学 ; 海洋科学 ; 海洋生物学 |
| 源URL | [http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/136680]  |
| 专题 | 海洋研究所_实验海洋生物学重点实验室 |
| 作者单位 | 1.中国科学院海洋研究所 2.中国科学院大学 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 李璐. 海带CRY-DASH基因的cDNA序列分离和表达分析[D]. 北京. 中国科学院大学. 2017. |
入库方式： OAI收割
来源：海洋研究所
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