WSSV囊膜蛋白VP28基因在蓝藻中克隆和表达
文献类型：学位论文
| 作者 | 张春莉 |
| 答辩日期 | 2002 |
| 文献子类 | 博士 |
| 授予单位 | 中国科学院海洋研究所 |
| 授予地点 | 中国科学院海洋研究所 |
| 关键词 | 白斑综合症病毒 Vp28蛋白 基因克隆 穿梭表达载体 转基因蓝藻 |
| 学位专业 | 海洋生物学 |
| 其他题名 | Cloning of Envelope protein VP28 Gene of WSSV and Its Expression in Cyanobacteria |
| 英文摘要 | 该研究通过蔗糖密度梯度离心分离纯化WSSV-中国株,在电镜观察下观察到不同病毒组分的大小、形态及负染后显示的精细结构;通过SDS-PAGE鉴定在囊膜组分、完整病毒粒子组分中的VP28蛋白.设计一对特异性PCR扩增引物.PCR法从WSSV-中国株基因组DNA中扩增得到vp28基因片段640bp,并在起始密码子ATG前,填加了适合于蓝藻表达系统高效表达的SD序列.进一步将vp28基因正向连接到海藻穿梭表达载体pRL-489上的启动子PpsbA下游,酶切鉴定连接正确.通过PCR扩增在DNA水平上验证vp28基因在两种鱼腥藻Anabaenasp.PCC7120中均以质粒形式存在,在聚球藻Synechococcussp.PCC7002中以整合形式存在于染色体DNA上.用制备的抗WSSV的抗血清,通过WesternBlotting在蛋白水平上证明vp28基因在两种鱼腥藻Anabaenasp.PCC7120中均得到了表达,分子量为28kD.该论文的研究目的是通过基因工程获得WSSV囊膜蛋白VP28的转基因蓝藻,期望有助于揭示WSSV感染对虾的分子机一,确定VP28的功能. |
| 语种 | 中文 |
| 公开日期 | 2010-11-04 |
| 页码 | 81 |
| 源URL | [http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/944]  |
| 专题 | 海洋研究所_海洋环流与波动重点实验室 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 张春莉. WSSV囊膜蛋白VP28基因在蓝藻中克隆和表达[D]. 中国科学院海洋研究所. 中国科学院海洋研究所. 2002. |
入库方式： OAI收割
来源：海洋研究所
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