胶州湾超微型浮游真细菌16s rDNA RFLP分析相关技术的研究
文献类型：学位论文
| 作者 | 潘晓驹 |
| 答辩日期 | 2000 |
| 文献子类 | 博士 |
| 授予单位 | 中国科学院海洋研究所 |
| 授予地点 | 中国科学院海洋研究所 |
| 关键词 | 浮游真细菌 Ta克隆 |
| 学位专业 | 水产养殖 |
| 英文摘要 | 通过生态学与分子生物学相结合的方法，对胶州湾超微型浮游真细菌从16s rDNA的角度分析其多样性，建立了一系列行之有效的方法，对于今后开展特定的超微型生物的研究提供他有益的借鉴。主要结果如下：1.建立了行之有效的从极稀密度的海水中提取浮游细菌总基因组DNA的方法，其得率约为0.3～0.5 μg/L海水，并且提供了DNA浓缩、纯化的一系列步骤，最后所制得的DNA其纯度和含量足以开展后续工作。2.建立了可靠的具有较高转化效率的感受态细胞，并从多个途径来制备，并对各种方法的成败及注意事项进行了探讨。3.对PCR反应的条件进行了深入的探讨，成功在从混合型基因组中扩增出细菌特异性引物(Universal 1406R和Eubacterial 68F)所对应的16s rDNA。并且对PCR的几个控制因子进行了分析，对于今后采用不同引物的高效扩增将提供有益的帮助。4.深入地对TA克隆效率进行了探讨，较好地将PCR混合产物分离开，并成功地导入大肠杆菌DH5α菌株，并对重组质粒进行了初步的RFLP分析，为今后通过序列测定构建系统进化树奠定了基础。5.RFLP分析表明胶州湾海水中至少含有7种亲缘关系较远的真细菌。 |
| 语种 | 中文 |
| 公开日期 | 2010-11-04 |
| 页码 | 38 |
| 源URL | [http://ir.qdio.ac.cn/handle/337002/994]  |
| 专题 | 海洋研究所_海洋环流与波动重点实验室 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 潘晓驹. 胶州湾超微型浮游真细菌16s rDNA RFLP分析相关技术的研究[D]. 中国科学院海洋研究所. 中国科学院海洋研究所. 2000. |
入库方式： OAI收割
来源：海洋研究所
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