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小麦 TaGAPC 定点突变体基因载体构建及其原核表达

文献类型：期刊论文


作者	郭子平 2; 翟清华 2; 曾令锋 2; 邓西平 1; 杨淑慎 2
刊名	华北农学报
出版日期	2016
卷号	31 期号:1 页码:46-50
关键词	Tagapc 重叠延伸 Pcｒ定点突变原核表达蛋白纯化
英文摘要	为了研究催化活性半胱氨酸 Cys 154 、Cys 158 残基对小麦细胞质甘油醛-3-磷酸脱氢酶(TaGAPC)蛋白酶活性的影响，利用重叠延伸 PCＲ法分别将这 2 个位点的半胱氨酸突变成丝氨酸，并分别连入 pET28a( + )原核表达载体。在 25 ℃条件下，TaGAPC 及其定点基因 TaCys154S/TaCys158S 经 0． 25 mmol/L IPTG 诱导后高效表达，SDS-PAGE 电泳检测结果显示，目标重组蛋白均为可溶性且大小约为 40 kDa，与预测结果一致。在此基础上，经超声波破菌及镍柱纯化获得 3 种纯化重组蛋白。这为后续 TaGAPC 及其定点突变体蛋白酶活性测定及活性位点分析提供试验材料。关键词:TaGAPC;重叠延伸 PCＲ;定点突变;原核表达;蛋白纯化
语种	中文
源URL	[http://ir.iswc.ac.cn/handle/361005/8670]
专题	水土保持研究所_水保所知识产出(1956-2013)
作者单位	1.西北农林科技大学黄土高原土壤侵蚀与旱地农业国家重点实验室，陕西杨凌 712100) 2.西北农林科技大学生命科学学院，陕西杨凌 712100
推荐引用方式 GB/T 7714	郭子平,翟清华,曾令锋,等. 小麦 TaGAPC 定点突变体基因载体构建及其原核表达[J]. 华北农学报,2016,31(1):46-50.
APA	郭子平,翟清华,曾令锋,邓西平,&杨淑慎.(2016).小麦 TaGAPC 定点突变体基因载体构建及其原核表达.华北农学报,31(1),46-50.
MLA	郭子平,et al."小麦 TaGAPC 定点突变体基因载体构建及其原核表达".华北农学报 31.1(2016):46-50.

入库方式： OAI收割

来源：水土保持研究所

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