本发明公开了荧光蛋白表达载体，利用能在全身普遍表达的启动子CMV驱动荧光蛋白在观赏鱼体内的表达，实现观赏鱼通体表达功能的荧光蛋白载体。荧光蛋白表达载体的构建方法及应用方法。本发明还公开了一种性腺组织特异性调控表达载体，是性腺特异性启动子kop驱动rtTA的表达，rtTA与四环素结合后，驱动TRE启动子启动下游Cre蛋白表达的质粒载体。该性腺组织特异性调控表达载体的构建方法及应用方法。本发明同时公开一种生态安全型转基因荧光观赏鱼的培育方法，培养得到的转基因观赏鱼经鉴定后确定为性腺无转基因成分。