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不同硒水平地区植物和人体中硒的形态分布和比较研究

文献类型:学位论文

作者谢申猛
学位类别博士
答辩日期1995-06-30
授予单位中国科学院研究生院
授予地点北京
导师彭安 ; 王子健
关键词 形态分布 硒蛋白 11 S蛋白 7S蛋白 乳清蛋白 人 血浆 人血红蛋白 人GSH.Px 白蛋白 Se—P 球蛋白.
学位专业环境科学
中文摘要在土壤一植物j动物或人传递链中的形态分布及转化情况是硒与健康研究的一个重要方面。许多研究者经过多年的研究,对我国不同类型土壤中硒的形态分布及转化情况有了一定的了解。近年来,对硒在动植物体中的形态分布及转化情况也有相对多的报道,并取得许多进展。本文以不同硒水平地区的自然样品为对象,分别选取自然状态下不同硒水平地区的大豆和人血液作为植物和动物的代表,研究了硒在植物(大豆)和动物或人(人血液)中的形态分布。现总结如下。
1.建立了程序化的可靠的方法:SDS—PAGE.HPLC.FLD,用以分离微量的蛋白,并对其中的硒含量进行测定;同时,首次结合SDS.PAGE和化学分离方法,探讨了硒与动植物蛋白的结合形式。
2.首次研究了天然状态作物中硒在不同含量水平时的形态分布变化。对大豆样品进行实验结果表明,硒广泛存在于大豆各化学组分中,但硒在植物中的分布是不均一的。蛋白质是主要的含硒组分,尤其乳清蛋白有很强的富集硒的能力,地区间的差异最大。硒在蛋白组分中的富集倍数为1.2.2.3。在SDS—PAGE分离出的27条蛋白组分条带中,采自高硒地区的恩施样品检出19条含硒条带;采自适硒地区的北京样品检出1 2条含硒条带;采自低硒地区的启东样品检出11条,显示不同硒水平地区大豆中不仅硒含量不同,硒结合蛋白也有很大差异。
3.分析了不同硒水平时硒在大豆蛋白亚基中的分布变化情况后,认为大豆蛋白结合硒的方式有三种类型,分别是固定结合、键合和疏松结合.大豆蛋白中,11S组分主要是键合方式结合硒,7S主要是疏松方式结合硒,乳清蛋白则三种方式都存在,依硒水平不同而分别占主导地位,是地区间变化最大的组分.在低硒时,大豆蛋白中的硒以乳清蛋白中固定结合的硒为主,键合方式的硒为辅;适硒时,固定结合的硒虽然比低硒时要高,但键合方式结合的硒是主要硒形式,同时疏松结合的硒也有存在;高硒时,固定结合和键合方式的硒的增加变慢,疏松结合的硒在乳清蛋白和7S中大量出
现,成为主要的方式。从硒在蛋白亚基中的分布看,不同硒水平大豆蛋白中,乳清蛋白的差别最大;从硒的数量看,7S组分地区间差别最大,因为7S组分的质量百分比最高。所以,不同硒水平地区大豆膳食中的差异,数量上的主要来自7S蛋白组分,硒形式上的差异主要来自乳清蛋白.这是硒的生物有效性和人体健康联系的基础.
4.在人血样品中,从SDS.PAGE分离得到的23条血浆蛋白条带中,恩施样品有1 O条条带测出了硒(>2SD),北京样品有7条测出了硒,榆林样品有4条测出了硒;在8条血细胞蛋白条带中,恩施,北京样品都有4条测出了硒,榆林样品则只测到3条;另外,在血细胞样品的电泳胶上相对分子量小
于14.3KDa部分,三个样品都检出了硒,证明血细胞中存在有分子量小于1 4.3KDa的含硒肽.硒在蛋白条带中的百分分布表明,硒在血浆和血细胞间的分配因地区不同而不同,北京适硒地区其分配比接近于1:1,但在低硒或高硒地区,硒都加强了在血浆中的分配比例,分别是1.5:1和1.8:1.在血浆中硒主要结合于白蛋白,Se.P和球蛋白,这同这些蛋白或亚基的质量百分比一致;结合于GSH—Px的硒不超过20%;在血细胞中,硒主要结合于血红蛋白,GSH。Px中硒很少,在4.0%以下.
5.与大豆蛋白相似,人血蛋白结合硒的方式也有三种类型,分别是专属性结合(固定结合)、非专属性结合(键合)和疏松结合.cGPx(22.6—22.1 KDa)、pGPx(22.4—2 1.9KDa)结合硒的方式是专属结合方式;白蛋白、Se.P、球蛋白和血红蛋白结合硒的方式主要是非专属性(键合方式);其他蛋白结合硒的方式主要是疏松结合方式.另外,条带51.7-43.4KDa结合硒的方式与GPx一样,象是一种新的硒蛋白,这有待进一步证实。本工作的特点是直接对实际环境样品进行了硒的形态分析,从而避免了过去工作中采用同位素标记方法所得结果与同位素硒形态相关、同位素标记方法不能直接应用于人体的缺点。所采用的SDS.PAGE是现有蛋白分离方法中分离效果最好的方法之一,将之与ppt级高灵敏度的HPLC.FLD测硒方法结合,能够对0.01ng的级硒水平的含硒蛋白或亚基进行鉴定,无疑对生物体内元素形态的分析提出了一个新的好方法。所得结果从分子水平更细致地阐明了剂量、形态转化、及这种转化与硒相关疾病发生机制的关系,为今后的研究奠定了良好的基础。
语种中文
公开日期2011-09-20
源URL[http://ir.rcees.ac.cn/handle/311016/970]  
专题生态环境研究中心_水污染控制实验室
推荐引用方式
GB/T 7714
谢申猛. 不同硒水平地区植物和人体中硒的形态分布和比较研究[D]. 北京. 中国科学院研究生院. 1995.

入库方式: OAI收割

来源:生态环境研究中心

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