铅损伤及其修复保护作用的分子生物学研究
文献类型：学位论文
| 作者 | 袁晓凡 |
| 学位类别 | 博士 |
| 答辩日期 | 2001-07-01 |
| 授予单位 | 中国科学院研究生院 |
| 授予地点 | 北京 |
| 导师 | 唐家骏 |
| 关键词 | 铅损伤 修复保护作用DNA mtDNA 白蛋白 Kappa-硒化卡拉胶 |
| 学位专业 | 环境科学 |
| 中文摘要 | 以真核细胞的DNA为对象，研究了铅的遗传毒性及硒的修复保护作用。本论文包括以下几部分内容： 1． 首次应用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术研究了铅对酿酒酵母细胞DNA的损伤及硒的修复保护作用。得到以下结论： l mg／L和8 mg／L的铅均严重损伤酿酒酵母细胞DNA的结构，表现为单链断裂(SSBs)及碱不稳定损伤， 高浓度的铅对DNA的损伤更为严重。铅在亲代与子代酵母细胞间发生了累积效应，使子代细胞DNA损伤加剧；低浓度的铅更易于在代间累积， 因而对机体具有更长期的危害性。酵母细胞的培养基中加入0．01g的kappa-Se(10000gg Se／g)后，低浓度的铅引发的DNA损伤在很大程度上得到了抑制，而kappa-Se对高浓度的铅引发的DNA损伤效果并不明显。 所建立起的应用单细胞凝胶电泳法研究铅引发的酵母细胞DNA损伤的实验方法快速、灵敏、易行，可应用该方法在分子生物学水平上深入研究铅的亚临床毒性效应。 2． 比较研究了铅对鸡血细胞DNA和白蛋白的损伤及硒的保护作用。结论为： 1)单细胞凝胶电泳法观察到1 mg／L的铅对鸡血细胞DNA的结构损伤严重。在正常生理条件下，饲料中添加Na2Se03(0-3 mg／Kg)和Kappa-~i西(0．3 mg／Kg)均未能有效发挥对机体的非特异性保护能力，而当机体受到外界铅刺激时，硒多糖作为一种有机硒，较Na2Se03具有更高的生物活性，能更好地保护细胞免受有毒化学品的伤害。 21傅立叶变换红外光谱结合二阶导数技术及重水代换方法的研究结果表明， 鸡血白蛋白(硒的主要载体蛋白)与pb2’结合后，规则的螺旋结构部分解旋成为松散的B．折叠和转角结构；各组鸡血白蛋白各二级结构的相对含量也发生了变化。其中，Kappa-Se组Ⅸ．螺旋含量的降低与基础日粮组几近相同，且均比Na2Se03组降低的稍少一些。显微红外光谱及其差光谱的结果显示pb2’与鸡血白 蛋白分子的结合位点是C--O基团的0原子及C-N基团的N原子。 3．分别应用单细胞凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳法研究了铅对连续三代小鼠全血细胞DNA损伤的累积效应及硒的作用。单细胞凝胶电泳实验表明铅对小鼠血细胞DNA单链断裂的累积效应十分明显，且随小鼠性别的不同而有所区别：对于雄性小鼠，铅的累积效应从第二代起便表现极为严重。但对于雌性小鼠，从第三代起，铅的累积效应才表现较为严重；琼脂糖凝胶电泳实验观察到了铅对小鼠血细胞DNA双链断裂的损伤作用，但未观察到规律性的累积效应。Kappa．硒化卡拉胶可以对铅引发的DNA单链、双链断裂损伤起到很好的修复保护作用。 4．应用琼脂糖凝胶电泳法研究了铅对酵母细胞线粒体DNA的毒性作用及硒对铅毒性的拈抗作用。结果表明铅对线粒体DNA有损伤作用，加Pb组中mtDNA的分子量明显小于对照组，而Kappa-~i西可以起到保护线粒体DNA免受铅损伤的作用。 |
| 学科主题 | 环境化学 |
| 公开日期 | 2011-11-02 |
| 源URL | [http://ir.rcees.ac.cn/handle/311016/1389]  |
| 专题 | 生态环境研究中心_中国科学院环境生物技术重点实验室 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 袁晓凡. 铅损伤及其修复保护作用的分子生物学研究[D]. 北京. 中国科学院研究生院. 2001. |
入库方式： OAI收割
来源：生态环境研究中心
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