内醚糖的生物利用与内醚糖激酶的研究
文献类型：学位论文
| 作者 | 谢慧君 |
| 学位类别 | 博士 |
| 答辩日期 | 2005-06-01 |
| 授予单位 | 中国科学院研究生院 |
| 授予地点 | 北京 |
| 导师 | 张洪勋 |
| 关键词 | 纤维素热解黑曲霉内醚糖激酶LC-ESI-MS/MS RT-PCR 分离纯化克隆鉴定内醚糖同化微生物 cellulosic pyrolysate Aspergillus niger levoglucosan kinase isolation and purification clone and identification levoglucosan- assimilating microorganism |
| 其他题名 | Study on Bioconversion of Levoglucosan and Levoglucosan Kinase |
| 学位专业 | 环境科学 |
| 中文摘要 | 过控制热解条件能从纤维素生物质获得主要的产品内醚糖Levoglucosan全名1,6-缩水-β-D-吡喃葡萄糖产率可达30.4%随着世界性的能源危机特别是采用快速热解工艺使得从富含纤维素生物质获得热解产物的产量大幅度提高利用热解产物内醚糖作为微生物发酵碳源和能源的研究越来越受到重视本论文以内醚糖的利用为出发点简化了内醚糖的制备方法研究了内醚糖的不同处理下微生物的转化利用情况对其关键酶内醚糖激酶的性质进行了研究对此酶的基因进行了克隆鉴定并对环境中内醚糖同化微生物和内醚糖对环境微生物群落的影响进行了研究 对从纤维素热解液中分离纯化内醚糖的方法进行了优化得到的内醚糖纯度较高可达95%以上将内醚糖经不同处理以黑曲霉诱变菌CBX-209为发酵菌株以葡萄糖为对照添加不同氮源研究内醚糖不同处理下的利用情况 为了进一步提高内醚糖的利用效率我们对内醚糖激酶进行了分离纯化及酶性质的研究结果表明该酶的最适反应温度是30最适反应pH为9.0在pH610的范围内都比较稳定对碱性条件的耐受力大于酸性条件在低于20的条件下酶活性都比较稳定对内醚糖和ATP的Km值分别为80mM和0.25mM底物的专一性很强用MALDI-TOF对肽指纹图谱的分析显示该蛋白是一种新的未报道的蛋白最终得到了内醚糖激酶的基因并对此基因通过在酿酒酵母H158中表达进行了验证 对土壤中内醚糖同化菌的分布及其对环境微生物群落的影响进行了研究结果表明几株丝状真菌 和酵母具有较强的内醚糖磷酸化能力其中酵母多为隐球酵母对此8种真菌的内醚糖激酶初纯液性质的研究表明它们从pH47稳定性越来越高在pH710的范围内比较稳定然而在pH达到12时酶剩余活性为零在碱性条件下的稳定性大于酸性条件下在4~30的范围内比较稳定高于30后酶迅速失活它们对内醚糖的Km值大不相同霉菌的都低于酵母的其中ChwRhodotorula aurantiaca的Km值最高为102 mM而Yt 5Penicillium herquei的最低为48 mM前者大约是后者的两倍但是它们对ATP的Km值却趋于一致都在0.2 mM0.35 mM的范围内 内醚糖对土壤水溶液中微生物群落的影响表明环境中添加内醚糖后会对原核微生物群落产生一定的影响DGGE图谱检测显示四种微生物成为优势菌群它们都属于未鉴定亲缘关系较近的芽孢杆菌的新种 |
| 学科主题 | 环境生物学 |
| 语种 | 中文 |
| 公开日期 | 2010-05-19 |
| 源URL | [http://ir.rcees.ac.cn/handle/311016/109]  |
| 专题 | 生态环境研究中心_中国科学院环境生物技术重点实验室 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 谢慧君. 内醚糖的生物利用与内醚糖激酶的研究[D]. 北京. 中国科学院研究生院. 2005. |
入库方式： OAI收割
来源：生态环境研究中心
浏览0
下载0
收藏0
其他版本
除非特别说明，本系统中所有内容都受版权保护，并保留所有权利。