孵黄蛋白原的纯化分析及汞、砷的快速生物检测
文献类型：学位论文
| 作者 | 时国庆 |
| 学位类别 | 博士 |
| 答辩日期 | 2003-06-01 |
| 授予单位 | 中国科学院研究生院 |
| 授予地点 | 北京 |
| 导师 | 江桂斌 |
| 关键词 | 卵黄蛋白原 离子交换膜色谱 汞 砷 生物检测 |
| 学位专业 | 环境科学 |
| 中文摘要 | 本论文研究了典型环境内分泌干扰物生物标志物一卵黄蛋白原的纯化与分析方法以及两种重要环境内分泌干扰物汞和砷的快速生化检测技术。 卵黄蛋白原是一种由雌激素诱导生成的高磷糖蛋白。正常情况下，雄性动物体内没有卵黄蛋白原，但是在雌激素或类雌激素的诱导下，雄性动物的肝脏中也可合成卵黄蛋白原，并分泌到血液中。所以，卵黄蛋白原被认为是一种理想的雌激素和类雌激素生物标志物。本文建立了一种从卵生脊椎动物血清中快速提取和纯化卵黄蛋白原的高效离子交换膜色谱方法，并对色谱分离条件进行了优化。当流动相流速为10 mL／min时，对卵黄蛋白原的纯化可在3 min内完成，蛋白纯度在95％以上。此方法被成功的用于四种不同种属的卵生脊椎动物卵黄蛋白原的纯化。 将高效离子交换膜色谱纯化与高效凝胶过滤色谱分析结合，本论文建立了一种可快速检测血清卵黄蛋白原的二步色谱分析方法。对血清卵黄蛋白原的实际检测限为20 u g／mL，加标回收率>80％，RSD<4．8％。该方法可用于检测化合物的中等或强雌激素效应。 作为环境内分泌干扰物“黑名单”中的两种重要的金属物质，汞、砷在环境水体中的污染一直是人们关注的热点。本论文研究开发了一种基于汞离子对脲酶的抑制反应的可灵敏检测水样中汞化合物的检测条。该检测条的反应区有两层膜组成：上层膜是一片固定有尿素酶的醋酸纤维素膜，下层膜是一片含有尿素及固定剂的精密pH试纸，颜色为黄色。检测原理是基于下层膜上黄色斑点的消失时间进行的。该黄色斑点的消失时间与样品中汞化合物的浓度成正比。在优化实验条件下，本检测条对于汞离子的检测限为O．2ng／mL，检测区间为0．2-200ng／mL。一些主要的重金属阳离子以及水样品中的其它基质对检测无影响。 利用亚砷酸根对乙酰胆碱酯酶具有抑制作用的特点，我们还研究了一种基于酶膜反应器的流动注射分析系统。通过在样品溶液中加入2-PAM和EDTA以屏蔽有机磷类毒剂及重金属阳离子的影响，实现了对饮用水中亚砷酸根的特异性检测。本方法的检测限为38 ng／mL，线性范围为50。1000 ng／mL。实验中研究的有机磷类毒剂、砷酸根及重金属阳离子对亚砷酸根的检测无干扰。 |
| 学科主题 | 环境化学 |
| 语种 | 中文 |
| 公开日期 | 2011-12-08 |
| 源URL | [http://ir.rcees.ac.cn/handle/311016/2064]  |
| 专题 | 生态环境研究中心_环境化学与生态毒理学国家重点实验室 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 时国庆. 孵黄蛋白原的纯化分析及汞、砷的快速生物检测[D]. 北京. 中国科学院研究生院. 2003. |
入库方式： OAI收割
来源：生态环境研究中心
浏览0
下载0
收藏0
其他版本
除非特别说明，本系统中所有内容都受版权保护，并保留所有权利。