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金铁锁鲨烯合酶cDNA的克隆和功能鉴定
文献类型:期刊论文
作者 | 戴住波 ; 钱子刚 ; 胡运乾 ; 黄璐琦 |
刊名 | 药学学报
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出版日期 | 2008 |
卷号 | 43期号:12页码:1245-1250 |
关键词 | 金铁锁 三萜皂苷 RACE GC-MS 金铁锁鲨烯合酶 |
ISSN号 | 0513-4870 |
中文摘要 | 濒危药用植物金铁锁(Psammosilene tunicoidesW.C.Wu et C.Y.Wu.)的有效成分三萜总皂苷有显著的药理活性。为克隆和鉴定金铁锁三萜皂苷生物合成途径中的关键酶基因——鲨烯合酶的全长cDNA,本研究采用同源兼并引物PCR和cDNA末端快速扩增(RACE)等方法克隆了其全长cDNA;结合大肠杆菌异源表达、体外酶促反应及针对产物化学结构的GC和GC-MS分析等方法鉴定了其功能。研究结果表明:金铁锁鲨烯合酶cDNA全长为1 663bp,含有1 245 bp的开放阅读框(ORF),编码414个氨基酸(计算分子质量为47.69 kD),5′非编码区(UTR)和3′UTR分别为260 bp和158 bp,GenBank注册号为EF585250,与三七、人参和甘草的鲨烯合酶的氨基酸序列有较高的同源性,分别为83%、82%和82%,而与裂变酵母、白色念珠菌和人的氨基酸序列的同源性分别只有35%、39%和47%;表达产物具有催化两分子法呢烯焦磷酸连接成鲨烯的活性。本研究克隆和鉴定了金铁锁鲨烯合酶的全长cDNA,为金铁锁次生代谢工程研究提供了重要基础。 |
收录类别 | cscd |
语种 | 中文 |
CSCD记录号 | CSCD:3475764 |
公开日期 | 2012-04-20 |
源URL | [http://ir.kib.ac.cn:8080/handle/151853/6209] ![]() |
专题 | 昆明植物研究所_中国科学院东亚植物多样性与生物地理学重点实验室 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 戴住波,钱子刚,胡运乾,等. 金铁锁鲨烯合酶cDNA的克隆和功能鉴定[J]. 药学学报,2008,43(12):1245-1250. |
APA | 戴住波,钱子刚,胡运乾,&黄璐琦.(2008).金铁锁鲨烯合酶cDNA的克隆和功能鉴定.药学学报,43(12),1245-1250. |
MLA | 戴住波,et al."金铁锁鲨烯合酶cDNA的克隆和功能鉴定".药学学报 43.12(2008):1245-1250. |
入库方式: OAI收割
来源:昆明植物研究所
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