人Ⅰ型胶原基因脂质体转染牛耳细胞克隆筛选方法
文献类型：期刊论文
| 作者 | 刘婷婷; 王亮; 吕自力; 彭涛; 王安江 |
| 刊名 | 西北农业学报
 |
| 出版日期 | 2009 |
| 期号 | 4页码:41198 |
| 关键词 | 胶原基因 转染 成纤维细胞 阳性克隆 |
| 中文摘要 | 构建连接有人Ⅰ型胶原基因的质粒(PGC1-collagen),利用脂质体介导的方法转染荷斯坦奶牛耳成纤维细胞,优化一系列转染条件以提高转染效率,再利用G418和GFP荧光的表达来筛选稳定转染的细胞,最后以未转染的成纤维细胞作为阴性对照组,PGC1-collagen作为阳性对照组对转染的细胞进行PCR验证。结果显示:在6孔培养板中细胞融合度达到50%~60%左右介导1~3μg重组质粒转染24 h,转染效率可达25%~30%,筛选单克隆细胞在荧光显微镜观察检测到绿色荧光蛋白的表达。在使用800 U的G418筛选效果最好,维持浓度300~600 U,获得25个稳定表达的阳性细胞系,从中选取6个克隆进行PCR验证。成功利用脂质体转染方法将人Ⅰ型胶原基因成功转染到荷斯坦奶牛耳成纤维细胞,PCR验证结果正确。 |
| 公开日期 | 2012-11-29 |
| 源URL | [http://ir.xjipc.cas.cn/handle/365002/1790]  |
| 专题 | 新疆理化技术研究所_资源化学研究室 |
| 作者单位 | 新疆金牛生物有限公司;中国科学院新疆理化技术研究所 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 刘婷婷,王亮,吕自力,等. 人Ⅰ型胶原基因脂质体转染牛耳细胞克隆筛选方法[J]. 西北农业学报,2009(4):41198. |
| APA | 刘婷婷,王亮,吕自力,彭涛,&王安江.(2009).人Ⅰ型胶原基因脂质体转染牛耳细胞克隆筛选方法.西北农业学报(4),41198. |
| MLA | 刘婷婷,et al."人Ⅰ型胶原基因脂质体转染牛耳细胞克隆筛选方法".西北农业学报 .4(2009):41198. |
入库方式： OAI收割
来源：新疆理化技术研究所
浏览0
下载0
收藏0
其他版本
除非特别说明，本系统中所有内容都受版权保护，并保留所有权利。