甲酸脱氢酶的固定化及酶学性质的研究
文献类型：学位论文
| 作者 | 宋艳艳 |
| 学位类别 | 理学硕士 |
| 答辩日期 | 2012-05-25 |
| 授予单位 | 中国科学院研究生院 |
| 导师 | 华绍烽 |
| 关键词 | 甲酸脱氢酶 磁性壳聚糖微球 磁性二氧化硅载体 固定化 酶学性质 Formate dehydrogenase Magnetic chitosan microspheres Magneticsilica supporters Immobilization Enzymic properties |
| 学位专业 | 物理化学 |
| 中文摘要 | 本论文将磁性材料用于甲酸脱氢酶的固定化，得到的固定化酶催化甲酸盐脱氢生成二氧化碳，实现辅酶再生。将甲酸脱氢酶分别固定在磁性壳聚糖微球和磁性二氧化硅载体上。 酶固定化后稳定性增加，易从反应系统中分离，能重复使用。 分别采用反相悬浮交联法和共沉淀法制备磁性壳聚糖微球载体， 并对其形貌结构进行了比较，结果表明，采用共沉淀法制备的磁性壳聚糖微球担载 Fe3O4 的效果好，故将其作为载体固定甲酸脱氢酶。最佳固定化条件：添加酶量 9 U∙g-1，pH 值 7.0，固定化时间 5 h。游离酶和固定化酶的最适反应温度分别为 50 ℃和30 ℃；游离酶的最适 pH值为 7.0，而固定化酶的最适 pH值为 6.0；将游离酶和固定化酶分别置于 60 ℃恒温水浴中放置 180 min 后，游离酶和固定化酶的残余酶活分别为 0.78 %和40.39 %；将游离酶和固定化酶分别置于不同 pH值的缓冲液中保存一小时后，固定化酶活力没有明显下降，但游离酶活大大降低；固定化酶重复使用 6次后，其残余酶活为 73.53 %。 采用戊二醛活化的磁性二氧化硅载体固定甲酸脱氢酶。最佳固定化条件：添加酶量 6 U∙g-1，pH值7.0，固定化时间 5 h。游离酶和固定化酶的最适反应温度分别为 50 ℃和 60 ℃；游离酶的最适 pH 值为 7.0，而固定化酶的最适 pH 值为6.0；将游离酶和固定化酶分别置于 60 ℃恒温水浴中放置 180 min 后，游离酶和固定化酶的残余酶活分别为 0.78 %和59.54 %；将游离酶和固定化酶分别置于不同pH值的缓冲液中保存一小时后，固定化酶活力没有明显下降，但游离酶活大大降低；固定化酶重复使用 6次后，其残余酶活为 77.66 %。 结果表明，固定化酶具有较好的热稳定性、酸碱稳定性和操作稳定性。 |
| 公开日期 | 2013-04-02 |
| 源URL | [http://210.77.64.217/handle/362003/2848]  |
| 专题 | 兰州化学物理研究所_OSSO国家重点实验室 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 宋艳艳. 甲酸脱氢酶的固定化及酶学性质的研究[D]. 中国科学院研究生院. 2012. |
入库方式： OAI收割
来源：兰州化学物理研究所
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