豆薯种子中一种抗植物病毒蛋白的分离纯化、晶体生长、数据收集和初步结晶学研究
文献类型：学位论文
| 作者 | 蔡建华 |
| 学位类别 | 硕士 |
| 答辩日期 | 2000 |
| 授予单位 | 中国科学院福建物质结构研究所 |
| 授予地点 | 中国科学院福建物质结构研究所 |
| 导师 | 林玉娟 |
| 关键词 | 豆薯 抗植物病毒蛋白 分离 纯化 晶体生长 结晶学 |
| 中文摘要 | 本文从豆科植物豆薯(Pachyrrhizus erosus)的种子中，经磷酸缓冲液粗提，SP-Sepharose Fast Flow柱，CM-Sepharose Fast Flow柱和Sephacryl S-200柱层析，得到了一种新的蛋白组分PE4。在SDS-PAGE和IEF电泳上均呈单一纯，在紫外区表现典型的蛋白吸收光谱。非还原的SDS-PAGE显示该蛋白的分子量为15kDa，还原的SDS-PAGE显示该蛋白的分子量明显小于14kDa，初步表明PE4中含有二硫键。酸解法测定了蛋白PE4的氨基酸组成，结果显示蛋白PE4中存在7个半胱氨酸，完全可以用来形成二硫键。IEF实验表明PE4的等电点为8.2。抗植物病毒活性实验显示PE4对烟草花叶病毒(TMV)具有抑制作用，是一个新的抗植物病毒蛋白。PE4蛋白用悬滴气相扩散法获得结晶。晶体最适的生长条件为20%(w/v) PEG6000, 0.1M磷酸缓冲液(PH 7.4)。晶体最大线度可达1.0mm * 0.6mm * 0.5mm。在MarResearch IP面探测器上收集到一套2.3A分辨率的X射线衍射强度数据。精化后的晶胞参数为a = 28.808A, b = 32.840A, c = 140.397A, α = β = γ = 90.0°。根据系统消光规律判断，该晶体属于正交晶系，空间群为P2_12_12_1或P2_122_1。按Matthews方法进行推算，一个结晶学不对称单元中含有一个蛋白质分子，Matthews常数V_m为2.15 A~3/Dalton，晶胞中的溶剂含量约为44%。 |
| 语种 | 中文 |
| 公开日期 | 2013-05-07 |
| 页码 | 67 |
| 源URL | [http://ir.fjirsm.ac.cn/handle/350002/7014]  |
| 专题 | 福建物质结构研究所_中科院福建物质结构研究所_学位论文 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 蔡建华. 豆薯种子中一种抗植物病毒蛋白的分离纯化、晶体生长、数据收集和初步结晶学研究[D]. 中国科学院福建物质结构研究所. 中国科学院福建物质结构研究所. 2000. |
入库方式： OAI收割
来源：福建物质结构研究所
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