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constructionofplres2acgfp1cdeukaryoticexpressionplasmidanditsexpressioninbonemarrowmesenchymalstemcells

文献类型:期刊论文

作者Song Fei2; Chen Yiqu2; Ma Xuehu2; Ge Dan2; Liu Tianqing2; Ma Yufang1; Cui Zhanfeng2
刊名中国组织工程研究与临床康复
出版日期2008-01-01
卷号012期号:008页码:1568
ISSN号1673-8225
英文摘要背景:骨髓间充质干细胞在体外易分离和扩增,还易于外源基因的转入及表达,在人类医学上被认为是一种理想的治疗性细胞和基因治疗中的靶细胞。 目的:探讨脂质体介导胞嘧啶脱氨酶基因转染兔骨髓间充质干细胞及其基因的表达。 设计:单一样本观察。 单位:大连市干细胞与组织工程研发中心,大连医科大学基础医学院生化室。 材料:实验于2006—03/2007—06在大连市干细胞与组织工程研发中心及大连医科大学基础医学院生化室完成。新西兰大白耳兔,5月龄,雌雄不拘,体质量2.0~2.5kg。 方法:以大肠杆菌JM109基因组DNA为模板,用PCR方法获得目的基因片段,定向克隆至载体pMD19-T,限制性内切酶消化鉴定、基因测序后,构建pIRES2-AcGFP1-CD真核表达质粒。同时对兔骨髓间充质干细胞取材、培养、鉴定。真核表达质粒经酶切鉴定后,采用Lipofectamine2000介导法转染经过鉴定的兔骨髓间充质干细胞。并于转染后24h在倒置荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达。主要观察指标:表达载体的构建及基因转染骨髓间充质干细胞鉴定。 结果:实验克隆出胞嘧啶脱氨酶基因,并将其与带荧光的真核表达载体pIRES2-AcGFP1连接。经转染兔骨髓间充质干细胞24h后,在倒置荧光显微镜488am蓝光激发下观察,pIRES2-AcGFP1-CD组和pIRES2-AcGFP1空载体组均可见细胞发出绿色荧光,未经转染的细胞未见发出绿色荧光,说明胞嘧啶脱氨酶基因成功转染了骨髓间充质干细胞。 结论:骨髓间充质干细胞有望成为胞嘧啶脱氨酶基因治疗中的理想载体。
语种英语
源URL[http://cas-ir.dicp.ac.cn/handle/321008/177363]  
专题大连化学物理研究所_中国科学院大连化学物理研究所
作者单位1.大连医科大学
2.中国科学院大连化学物理研究所
推荐引用方式
GB/T 7714
Song Fei,Chen Yiqu,Ma Xuehu,et al. constructionofplres2acgfp1cdeukaryoticexpressionplasmidanditsexpressioninbonemarrowmesenchymalstemcells[J]. 中国组织工程研究与临床康复,2008,012(008):1568.
APA Song Fei.,Chen Yiqu.,Ma Xuehu.,Ge Dan.,Liu Tianqing.,...&Cui Zhanfeng.(2008).constructionofplres2acgfp1cdeukaryoticexpressionplasmidanditsexpressioninbonemarrowmesenchymalstemcells.中国组织工程研究与临床康复,012(008),1568.
MLA Song Fei,et al."constructionofplres2acgfp1cdeukaryoticexpressionplasmidanditsexpressioninbonemarrowmesenchymalstemcells".中国组织工程研究与临床康复 012.008(2008):1568.

入库方式: OAI收割

来源:大连化学物理研究所

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