乳腺癌，是全球女性发病率第一的乳腺上皮来源恶性肿瘤，严重危害女性身心健康。近年我国乳腺癌死亡率和发病率均不断攀升，且呈年轻化趋势。乳腺癌是一种高度异质性疾病，根据分子分型可将其分为Luminal型（雌激素受体ER和孕激素受体PR均为阳性）、HER2（人表皮生长因子受体-2）过表达型及三阴性乳腺癌（TNBC:PR,ERα,HER2表达均为阴性）。不同亚型治疗策略不同，因此找到其有效的靶向治疗药物，提高患者生存率，是所有乳腺癌研究者的共同目标。蛋白质翻译后的泛素化修饰可被去泛素化酶（DUBs: deubiquitinating enzymes）逆转。通常，蛋白被泛素化修饰后降解，而去泛素化酶（DUBs）则使蛋白去泛素化增强其稳定性，在泛素蛋白酶体调控中发挥重要作用。 大量研究发现，去泛素化酶与肿瘤发生紧密联系，且能被开发为有效的肿瘤靶向治疗药物。丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1（mitogen-activated protein kinase phosphatase1，MKP-1）是一种络氨酸磷酸酶，主要通过直接调控丝裂原活化蛋白激酶系统（mitogen-activated protein kinase system，MAPKs）发挥功能, 具双特异性磷酸酶活性。MAPK体系与细胞生长、分化、增殖、凋亡及炎症等反应密切相关。有文献报道，一方面，MKP-1在乳腺癌病程中一直处于高表达状态，我课题组前期研究也证明，MKP-1受KLF5 调控在乳腺癌中高表达，促进癌细胞的增殖和存活；另一方面，MKP-1过表达是多种癌症在化疗过程中产生耐药的重要原因。虽然MKP-1通过泛素-蛋白酶体途径降解已有报道－SCFSkp2能作为 MKP-1的E3泛素连接酶促进其降解，但关于使之稳定的的去泛素化调控目前还未知。于是，我们提出科学猜想：MKP-1的去泛素化酶通过使MKP-1去泛素化稳定其表达，从而促进乳腺癌细胞的增殖、生存与化疗耐药，具有癌蛋白功能。因此，找寻MKP-1的DUBs，可使之成为一个有效的抗癌药物靶点。首先，我们对去泛素化酶文库约90个去泛素化酶siRNA进行筛选，查找MKP-1的潜在去泛素化酶。经过多轮多遍筛查和验证，最后确定STAMBPL1是MKP-1的候选去泛素化酶，同时发现USP31也是MKP-1的候选DUB之一。为进一步确定STAMBPL1可增加MKP-1的蛋白稳定性，我们在多个细胞系包括SUM149pt、MDA-MB-231、HCC1937和MCF10A中转染靶向STAMBPL1不同位置的siRNA。敲低STAMBPL1后，内源MKP-1蛋白水平在不同细胞系中均显示下调，且MKP-1蛋白半衰期被明显缩短。我们还构建了STAMBBPL1去泛素化酶活突变体STAMBPL1E292A，将二者同时在细胞中过表达，STAMBPL1能够明显提高MKP-1蛋白水平，而突变体则无法实现这一功能。接下来，在体内外泛素化实验中证明了敲低STAMBPL1后，内源MKP-1的泛素化水平明显上调；过表达STAMBPL1，外源MKP-1的泛素化水平下降，而STAMBPL1E292A没有此生理功能。免疫共沉淀实验表明，在内源或外源情况下，STAMBPL1与MKP-1之间均存在相互作用。这一结果为更进一步探索STAMBPL1稳定MKP-1的作用机制奠定了基础。综上所述，这些结果表明STAMBPL1是MKP-1的去泛素化酶，同时为下一步研究STAMBPL1通过MKP-1在乳腺癌中发挥的功能奠定了良好的基础并提供了可靠的依据，并使STAMBPL1可能成为一个新的用于乳腺癌诊断预后和治疗的分子靶标。