本研究首次对大额牛的精液进行了低温冷冻保存。实验结果表明，滴冻优于程控慢速冷冻；精浆对大额牛精子的冷冻复苏率无显著影响(P>0.05)；甘油浓度为6%(w/v)时，冷冻复苏率最高；乳糖(61.8+-2.0%)和蔗糖(48.5+-2.6%)的冻存效果显著优于葡萄糖(36.0+-2.0%)，同时，乳糖和蔗糖(LSGY,70.5+-1.5%)在冷冻中显示了协同防冻效应(P<0.01)。对以上各种防冻液滴冻保存的精液品质，还用精子低渗肿胀试验(HOS)和金黄地鼠裸卵穿透试验(SPA)进行了评定。HOS试验和SPA试验评定的结果与冷冻复苏率结果高度一致。HOS与(MRR(r=0.94, P<0.006)和SPA与MRR(r=0.93, P<0.069)之间存在显著的相关性。电镜下观察发现，冷冻后精子质膜和顶体是冷冻损伤的主要部位。研究结果提示：1）LSGY防冻液适合于大额牛精液的滴冻保存。2）防冻液中不同的糖类对精子的冷冻复苏率能产生显著影响，双糖的防冻作用优于单糖，乳糖和蔗糖的合理搭配，可以产生协同保护效应。3）精子的冷冻损伤主要发生在质膜和顶体上，糖类对精子的冷冻保护作用，可能是通过与膜上磷脂分子的相互作用而实现的。