电鳐(Narcine timlei)乙酰胆碱受体的分离纯化
文献类型:期刊论文
作者 | 龚潮梁; 孙欣; 潘淑英; 何其伟; 宋世廉 |
刊名 | 动物学研究
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出版日期 | 1981 |
卷号 | 2期号:2 Suppl页码:51-57 |
关键词 | 眼镜蛇神经毒素 电鳐 冻干粉 氨基甲酰 受体蛋白 |
英文摘要 | 丁氏双鳍电鳐(Narcine timlei)新鲜电器官的匀浆,经冷冻干燥制成冻干粉(每克冻干粉相当于17.5克新鲜电器官)。10克冻干粉的细胞膜碎片用含1%Triton X-100的溶液提取,此悬浮液经100,000g离心,取其上清液对Sepharose-4B-眼镜蛇神经毒素进行亲和吸附。每毫升压缩的亲和胶含有华南眼镜蛇(Naja naja atra)的神经毒素0.25mg。吸附后的亲和凝胶用几种缓冲液洗去非特异性吸附的蛋白,最后用含1M氨基甲酰胆硷的溶液解脱乙酰胆硷受体(AchR)。有含AchR的氨基甲酰胆硷解脱液对含0.02%去氧胆酸钠的磷酸缓冲液充分透析,以除去氨基甲酰胆硷。从10克冻干粉中最后得到约10mg纯化的AchR。 提纯的AchR能与131I-眼镜蛇神经毒素结合,生成的AchR-131I-眼镜蛇神经毒素复合物用Sephadex G-200凝胶过滤分开后,求得其比结合力为4.7nmol/mg蛋白。此种结合能为眼镜蛇神经毒素、d-筒箭毒和十甲鎓所抑制,当这些竞争性抑制剂的浓度为131I-眼镜蛇神经毒素浓度的300倍时,其抑制率分别为88%、48%和55%。提纯的AchR在含有0.1%Triton X-100的聚丙烯酰胺凝胶电泳时,显示单一的区带;乙酰胆硷酯酶活力很低,其比活力仅为0.05OD412/分·mg蛋白。 |
语种 | 中文 |
源URL | [http://159.226.149.26:8080/handle/152453/11934] ![]() |
专题 | 昆明动物研究所_其他 |
作者单位 | 中国科学院昆明动物研究所 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 龚潮梁,孙欣,潘淑英,等. 电鳐(Narcine timlei)乙酰胆碱受体的分离纯化[J]. 动物学研究,1981,2(2 Suppl):51-57. |
APA | 龚潮梁,孙欣,潘淑英,何其伟,&宋世廉.(1981).电鳐(Narcine timlei)乙酰胆碱受体的分离纯化.动物学研究,2(2 Suppl),51-57. |
MLA | 龚潮梁,et al."电鳐(Narcine timlei)乙酰胆碱受体的分离纯化".动物学研究 2.2 Suppl(1981):51-57. |
入库方式: OAI收割
来源:昆明动物研究所
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