聚合酶链反应用于高效的基因改造
文献类型：期刊论文
| 作者 | 杨香娇; 陈常庆; 王德宝; 杨胜利 |
| 刊名 | 中国科学(B辑 化学 生命科学 地学)
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| 出版日期 | 1990-05-31 |
| 期号 | 05页码:497-502 |
| 关键词 | 聚合酶链反应 EcoR1基因改造 DNA顺序分析 Taq DNA聚合酶 |
| 文献子类 | Article |
| 英文摘要 | 本文报道利用近年来发展起来的基因体外扩增技术——聚合酶链反应(PCR)进行高效的基因定向改造的结果。在构建新的EcoRI基因表达质粒时,为了在EcoRⅠ基因SD序列前改变一个碱基引入SalⅠ切点以缺失其启动子,同时将Glul44改造成Lys,我们回收分离pER101的1.5kb SalⅠ/PatⅠ片段作为模板,合成各带一个错配的两个25聚DNA片段作为扩增引物,利用Taq DNA聚合酶进行PCR扩增,结果经过30个循环,从约0.05μg模板DNA得到约10μg的0.49kbDNA。根据理论计算,扩增产物中突变片段占99％以上。用SalⅠ/BglⅠ酶切克隆入pUCl9 SalⅡ/BamHI,任意取两个重组子进行序列分析结果表明都发生了预期的突变。扩增产物已被克隆入pER304,使得EcoRl(Lys-144)基因置于PL下游以实现其控制的高表达。 |
| 语种 | 中文 |
| 源URL | [http://119.78.100.183/handle/2S10ELR8/271083]  |
| 专题 | 中国科学院上海药物研究所 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 杨香娇,陈常庆,王德宝,等. 聚合酶链反应用于高效的基因改造[J]. 中国科学(B辑 化学 生命科学 地学),1990(05):497-502. |
| APA | 杨香娇,陈常庆,王德宝,&杨胜利.(1990).聚合酶链反应用于高效的基因改造.中国科学(B辑 化学 生命科学 地学)(05),497-502. |
| MLA | 杨香娇,et al."聚合酶链反应用于高效的基因改造".中国科学(B辑 化学 生命科学 地学) .05(1990):497-502. |
入库方式： OAI收割
来源：上海药物研究所
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