大鼠lipocalin 11蛋白非保守半胱氨酸双点突变体样品制备及理化性质表征
文献类型:期刊论文
作者 | 顾轶娜; 林东海 |
刊名 | 药物生物技术
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出版日期 | 2011-06-15 |
卷号 | 18期号:03页码:189-194 |
关键词 | Lipocalin11蛋白 半胱氨酸突变 样品制备 配体结合 |
文献子类 | Article |
英文摘要 | Lipocalin 11蛋白是新发现的一个lipocalin分泌型蛋白家族成员,与男性生殖密切相关。大鼠lipocalin 11(rLcn11)蛋白中4个半胱氨酸往往不能正确配对,为重组蛋白样品的制备带来困难。该研究通过序列比对和同源模建的方法获得rLcn11蛋白非保守半胱氨酸的位点,构建了rLcn11蛋白野生型与C59A/C156A突变体的表达系统和纯化方法。通过分子筛和圆二色谱分析rLcn11蛋白的聚集形态和结构特征,并用荧光滴定的方法研究了rLcn11蛋白与荧光探针ANS的结合能力。结果表明:(1)rLcn11蛋白非保守半胱氨酸残基的突变有利于减少蛋白的错误折叠和聚集,提高重组蛋白的产量;(2)rLcn11 C59A/C156A突变体的空间结构良好并能结合疏水性配体;(3)rLcn11蛋白Cys59、Cys156双点突变不显著地改变rLcn11蛋白的空间结构及其与配体的结合能力。该工作为rLcn11蛋白的空间结构解析和生理功能的研究奠定了基础。 |
资助项目 | 国家自然科学基金项目[30730026] ; 上海市优秀学科带头人项目[09XD1405100] |
语种 | 中文 |
源URL | [http://119.78.100.183/handle/2S10ELR8/269787] ![]() |
专题 | 分析化学研究室 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 顾轶娜,林东海. 大鼠lipocalin 11蛋白非保守半胱氨酸双点突变体样品制备及理化性质表征[J]. 药物生物技术,2011,18(03):189-194. |
APA | 顾轶娜,&林东海.(2011).大鼠lipocalin 11蛋白非保守半胱氨酸双点突变体样品制备及理化性质表征.药物生物技术,18(03),189-194. |
MLA | 顾轶娜,et al."大鼠lipocalin 11蛋白非保守半胱氨酸双点突变体样品制备及理化性质表征".药物生物技术 18.03(2011):189-194. |
入库方式: OAI收割
来源:上海药物研究所
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