新结构拓扑异构酶Ⅱ抑制剂D11的体内外抗肿瘤和作用机制研究
文献类型：会议论文
| 作者 | 桂敏; 李英霞; 耿美玉 ; 丁健
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| 出版日期 | 2009-04-09 |
| 关键词 | 抗肿瘤 糖苷类 体内外 拓扑异构酶Ⅰ D11 抑制剂 浮选药剂 化合物 异构 |
| 页码 | 2 |
| 英文摘要 | 目的:糖苷化合物中的糖基对化合物的修饰和活性都有非常重要的作用。本论文主要研究了一系列以DP为苷元的糖苷类化合物。以往的研究发现DP具有较好的体内外抗肿瘤活性,并且其自然界中存在的某些糖苷在保留了抗肿瘤活性的同时还能降低DP对正常细胞的毒性。尽管前期研究解释了该类化合物的一些药理作用机制,但其具体的细胞内作用靶点尚不清楚,也没有进行系统的药效学评价和机制研究。本研究首先阐明了DP及其糖苷衍生物的药理作用靶点和构效关系,并进一步证实了改造后活性增强的DP糖苷在体内外的抗肿瘤活性。方法:首先,通过体外肿瘤细胞增殖抑制试验,kDNA去连环试验,对合成的系列DP糖苷化合物进行了较为全面的生物活性评价。接下来选择活性较好的化合物D11进一步研究,通过DNA解旋实验和切割实验,kDNA去连环实验测定了D11对拓扑异构酶Ⅱ的抑制作用。并且运用了彗星实验、免疫印迹、免疫荧光实验和单克隆形成实验进一步确证了D11及其苷元Diphyllin是拓扑异构酶Ⅱ的催化抑制剂。通过MTT法和SRB法,以及裸小鼠体内移植瘤实验测定了D11对人类肿瘤的体内外抗肿瘤活性。然后通过RNA干扰技术确定了D11的主要作用靶点。另外,通过荧光偏振实验、ATP水解实验和表面等离子共振技术,分子对接等技术对D11的作用模式进行了深入分析。结果:通过体外肿瘤细胞增殖抑制试验和kDNA去连环试验,表明该系列化合物有体外抗肿瘤活性和TopoⅡ抑制活性,糖基的修饰对化合物的活性起到至关重要的作用,并且呈良好的构效关系,提示TopoⅡ是该类化合物的主要靶点。另外该系列化合物还能引起HL-60细胞周期阻滞并诱导细胞凋亡。构效关系分析显示糖基部分为6-脱氧吡喃糖的化合物比糖基为普通糖的化合物活性更强。DNA拓扑异构酶Ⅰ/Ⅱ介导的pBR322解螺旋实验和TopoⅡ介导的kDNA去连环实验结果表明,D11对拓扑异构酶Ⅰ无抑制作用,仅对拓扑异构酶Ⅱα的活性有抑制作用,且作用强于母核DP。通过TopoⅡ介导的DNA切割实验发现,D11并不能诱导可切割复合物的形成。但是与传统TopoⅡ催化抑制剂不同的是,D11不能拮抗VP16引起的可切割复合物的形成,以及VP16诱导的DNA彗星拖尾和γ-H2AX磷酸化的升高,提示D11可能并不作用于TopoⅡ催化循环中可切割复合物形成之前的催化环节,表明D11能抑制TopoⅡ催化循环过程中的ATP水解,并且能够直接和TopoⅡ的ATPase结构域结合,D11的糖基在和ATP口袋的结合中起到重要作用。综合上述,本研究初步评价了DP及其糖苷类化合物的生物学活性并阐明了其构效关系,确认了D11的体外抗肿瘤活性,并进一步证实D11是一个新的DNA非嵌入型TopoⅡ催化抑制剂,它能够抑制TopoⅡ介导的ArP的水解。其分子机制在于D11能够竞争ATP结合于TopoⅡα的ATPase结构域。 |
| 会议录 | 2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集
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| 文献子类 | Article |
| 语种 | 中文 |
| 源URL | [http://119.78.100.183/handle/2S10ELR8/267395]  |
| 专题 | 药理学第一研究室 |
| 作者单位 | 中国科学院上海药物研究所,药理学第一研究室,上海 201203, 中国. |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 桂敏,李英霞,耿美玉,等. 新结构拓扑异构酶Ⅱ抑制剂D11的体内外抗肿瘤和作用机制研究[C]. 见:. |
入库方式： OAI收割
来源：上海药物研究所
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