目的建立蜘蛛香HPLC指纹图谱,为其质量控制提供科学依据。方法采用■ C₁₈色谱柱（4.6 mm×250mm,5μm）,乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）为流动相梯度洗脱,检测波长为327 nm（0～33 min）、256 nm（33～90 min）,体积流量为1.0 m L·min^-1,柱温为30℃。通过相似度评价、聚类分析（HCA）、主成分分析（PCA）、偏最小二乘判别分析（PLS-DA）对25批蜘蛛香指纹图谱进行分析。结果建立了25批蜘蛛香HPLC指纹图谱,标定了36个共有峰,指认了9个共有峰,其中18批样品相似度大于0.9,所有样品可分成2类,发现缬草三酯、乙酰缬草三酯、异绿原酸A等6个差异较大的成分。结论HPLC指纹图谱结合化学模式识别能较好地反映蜘蛛香的整体质量,可为蜘蛛香质量控制和评价提供参考。