人蛋白酶体亚基PSMB1的重组表达、纯化及在蛋白酶体抑制剂体外筛选中的应用
文献类型：期刊论文
| 作者 | 范翠英1; 冯利兴2; 张冬梅2; 潘素娜1; 刘璇2; 果德安2 ; 樊金玲1
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| 刊名 | 生物工程学报
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| 出版日期 | 2012 |
| 卷号 | 028期号:002页码:233 |
| 关键词 | PSMB1 原核表达 BIAcore 体外筛选 |
| ISSN号 | 1000-3061 |
| 英文摘要 | 蛋白酶体是真核细胞中的一类多亚基蛋白酶复合物,它在胞内蛋白质降解的泛素-蛋白酶体通路中起关键作用。重组表达蛋白酶体的活性亚基可以用于在体外筛选、寻找具有蛋白酶体抑制剂作用的化合物。将人蛋白酶体催化亚基（PSMB1）cDNA的编码区（全长726 bp）克隆至原核表达载体pET28a（＋）,构建重组质粒pET28a-PSMB1,转化大肠杆菌BL21（DE3）,通过1 mmol/L IPTG,20℃过夜诱导,获得相对分子量约为27 kDa的重组蛋白,采用IMAC亲和层析柱纯化重组蛋白,纯化后的重组蛋白纯度超过95%。重组蛋白酶解后经NanoLC-MS/MS鉴定表明所表达的融合蛋白氨基酸序列完全正确。在体外BIAcore分析中,重组蛋白表现出对不同化合物的选择性结合能力,其中与蛋白酶体抑制剂雷公藤红素的结合较强,10μmol/L的雷公藤红素与重组蛋白的结合达到27 RU,并且具有良好的浓度依赖型。本研究建立了表达、纯化人蛋白酶体催化亚基PSMB1的方法,并应用于具有蛋白酶体抑制活性化合物的体外筛选。 |
| 语种 | 英语 |
| 源URL | [http://119.78.100.183/handle/2S10ELR8/286836]  |
| 专题 | 中国科学院上海药物研究所 |
| 作者单位 | 1.河南科技大学 2.中国科学院上海药物研究所 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 范翠英,冯利兴,张冬梅,等. 人蛋白酶体亚基PSMB1的重组表达、纯化及在蛋白酶体抑制剂体外筛选中的应用[J]. 生物工程学报,2012,028(002):233. |
| APA | 范翠英.,冯利兴.,张冬梅.,潘素娜.,刘璇.,...&樊金玲.(2012).人蛋白酶体亚基PSMB1的重组表达、纯化及在蛋白酶体抑制剂体外筛选中的应用.生物工程学报,028(002),233. |
| MLA | 范翠英,et al."人蛋白酶体亚基PSMB1的重组表达、纯化及在蛋白酶体抑制剂体外筛选中的应用".生物工程学报 028.002(2012):233. |
入库方式： OAI收割
来源：上海药物研究所
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