无距虾脊兰ISSR-PCR反应体系的建立与优化
文献类型:期刊论文
作者 | 钱鑫2; 连静静2; 刘芬1; 牛晓玲3; 王彩霞2; 田敏2 |
刊名 | 植物研究
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出版日期 | 2013 |
卷号 | 33期号:06页码:746-751 |
关键词 | 无距虾脊兰 ISSR 正交设计 |
英文摘要 | 利用正交实验设计的方法,对珍稀植物无距虾脊兰ISSR-PCR反应的5个因素(Mg2+、dNTPs、引物、模板DNA和Taq DNA聚合酶)4个水平进行试验,并通过梯度PCR实验确定引物的最佳退火温度和循环次数,最终确定无距虾脊兰的最佳反应体系为:25μL的体系中含3.0 mmol L-1Mg2+、0.3 mmol·L-1dNTP、0.4μmol·L-1引物、2.5 ng·μL-1模板DNA、0.08 U·μL-1Taq DNA聚合酶以及1×PCR buffer;扩增程序为94℃预变性5 min;94℃变性1 min,退火1 min(根据不同引物选择不同的退火温度),72℃延伸1 min,循环40次;72℃延伸10 min;12℃终止反应。该ISSR-PCR体系的建立,为今后利用ISSR技术对无距虾脊兰及其近缘种的分子系统学以及遗传多样性的研究奠定基础。 |
源URL | [http://210.77.82.179/handle/2SCSIERX/3191] ![]() |
专题 | 研究领域 中国科学院华南植物园 |
作者单位 | 1.中国科学院华南植物园,广州 510650; 2.中国林业科学研究院亚热带林业研究所,富阳311400; 3.天目山国家自然保护区管理局,临安 311311) |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 钱鑫,连静静,刘芬,等. 无距虾脊兰ISSR-PCR反应体系的建立与优化[J]. 植物研究,2013,33(06):746-751. |
APA | 钱鑫,连静静,刘芬,牛晓玲,王彩霞,&田敏.(2013).无距虾脊兰ISSR-PCR反应体系的建立与优化.植物研究,33(06),746-751. |
MLA | 钱鑫,et al."无距虾脊兰ISSR-PCR反应体系的建立与优化".植物研究 33.06(2013):746-751. |
入库方式: OAI收割
来源:华南植物园
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