利用烟草的cDNA酵母表达文库筛选镉胁迫相关基因
文献类型：期刊论文
| 作者 | 李静1,2; 王晶1,2; 张美1 |
| 刊名 | 河南农业科学
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| 出版日期 | 2013 |
| 卷号 | 42期号:03页码:46-49 |
| 关键词 | 烟草 重金属 镉胁迫 cDNA文库 功能基因 |
| 英文摘要 | 为了鉴定烟草在重金属镉胁迫处理下的功能基因,构建烟草cDNA酵母表达文库,并利用镉敏感的突变株对文库进行初步筛选。首先将烟草幼苗进行重金属胁迫处理,然后取幼根提取总RNA并纯化mRNA,采用SMART技术反转录成双链cDNA,将cDNA与入门载体pDONR222的同源重组区连接,再转到酵母表达载体pDEST22上,构建了Gateway技术兼容的酵母cDNA表达文库。经检测,构建的cDNA酵母表达文库滴度为4.32×106 cfu/mL,库容量为0.86×107 cfu,平均插入片段长度大于1kb,文库质量较高。通过镉敏感酵母突变株Δycf1筛选烟草重金属镉胁迫相关基因,获得酵母单克隆70个。经分析可知,其涉及到谷胱甘肽转移酶、铜分子伴侣及甲硫蛋白等24个不同蛋白基因,初步鉴定为烟草应答重金属镉胁迫的候选基因。 |
| 源URL | [http://210.77.82.179/handle/2SCSIERX/3301]  |
| 专题 | 研究领域 中国科学院华南植物园 |
| 作者单位 | 1.中国科学院华南植物园／中国科学院植物资源保护与可持续利用重点实验室,广东广州 510650; 2.中国科学院大学，北京 100049 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 李静,王晶,张美. 利用烟草的cDNA酵母表达文库筛选镉胁迫相关基因[J]. 河南农业科学,2013,42(03):46-49. |
| APA | 李静,王晶,&张美.(2013).利用烟草的cDNA酵母表达文库筛选镉胁迫相关基因.河南农业科学,42(03),46-49. |
| MLA | 李静,et al."利用烟草的cDNA酵母表达文库筛选镉胁迫相关基因".河南农业科学 42.03(2013):46-49. |
入库方式： OAI收割
来源：华南植物园
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