薇甘菊水杨酸羧甲基转移酶基因的分离鉴定及表达分析
文献类型:期刊论文
作者 | 王文天2,3; 彭少麟1,3; 李冬梅1; 王冬梅1; 王瑞龙1; 田彩娟3; 赵厚本3; 户桂敏3 |
刊名 | 热带亚热带植物学报
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出版日期 | 2009 |
卷号 | 17期号:05页码:445-450 |
关键词 | 薇甘菊 SAMT RACE 原核表达 Western blot RT-PCR |
英文摘要 | 为研究水杨酸羧甲基转移酶基因在植物防御系统中的作用,采用RACE法从薇甘菊(Mikania micrantha)cDNA文库中克隆到薇甘菊水杨酸羧甲基转移酶基因SAMT全长cDNA,并进行外源表达以及水杨酸诱导模式分析。结果表明,该基因cDNA全长1299 bp,其中编码区长1089 bp,编码362个氨基酸,Blast显示该基因编码的氨基酸序列与仙女扇(Clarkia breweri)的相似性为74%,证实其主要功能是将水杨酸(salicylic acid,SA)甲基化成水杨酸甲酯(methyl salicylate,MeSA),由此将该基因命名为MmSAMT,GenBank登录号为FJ869889。将MmSAMT编码序列克隆至pET-32a(+)载体,转化Rosetta-gami(DE3)中表达,SDS-PAGE显示单体分子量在40 kD左右,与预测结果一致。Western blot显示在20℃、0.05 mmol/L IPTG和180 r min-1下诱导6 h,可获得较多的可溶性蛋白质。对喷施100μmol/L SA薇甘菊叶片中MmSAMT的转录谱进行研究,该基因的诱导受到SA的激活,48 h的表达水平达最高,暗示MmSAMT可能通过催化合成MeSA引发系统获得性抗性,提高抗性防御的警戒等级。 |
源URL | [http://210.77.82.179/handle/2SCSIERX/3735] ![]() |
专题 | 研究领域 |
作者单位 | 1.中山大学生命科学学院,广州 510275 2.中国科学院研究生院,北京 100049; 3.中国科学院华南植物园,广州 510650; |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 王文天,彭少麟,李冬梅,等. 薇甘菊水杨酸羧甲基转移酶基因的分离鉴定及表达分析[J]. 热带亚热带植物学报,2009,17(05):445-450. |
APA | 王文天.,彭少麟.,李冬梅.,王冬梅.,王瑞龙.,...&户桂敏.(2009).薇甘菊水杨酸羧甲基转移酶基因的分离鉴定及表达分析.热带亚热带植物学报,17(05),445-450. |
MLA | 王文天,et al."薇甘菊水杨酸羧甲基转移酶基因的分离鉴定及表达分析".热带亚热带植物学报 17.05(2009):445-450. |
入库方式: OAI收割
来源:华南植物园
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