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新疆雪莲体胚诱导及成苗方法研究

文献类型:学位论文

作者贾莉芳
答辩日期2007-06
授予单位中国科学院研究生院
授予地点中国科学院新疆理化技术研究所
导师王晓军
关键词新疆雪莲 体细胞胚胎发生 形态建成 同工酶 可溶性蛋白
学位名称硕士
学位专业生物有机化学
英文摘要

本研究以新疆特色药用植物-新疆雪莲的子叶为外植体,通过固体培养和液体培
养相结合的方法,对影响体细胞胚胎发生的多种影响因子进行筛选,建立了一个稳定的新疆雪莲体细胞胚胎发生的培养体系。并从组织细胞学、同工酶酶谱和特异蛋白质三个方面,对新疆雪莲体细胞胚胎形态建成的机理进行了初步探索,其主要结果如下:1、新疆雪莲可通过以下途径实现体细胞胚胎发生:以生长15d 左右无菌苗的子叶为外植体,在附加0.1mg/L2,4-D、0.5mg/LBA 的MS 固体培养基上诱导愈伤组织。随后挑选胚性愈伤组织转入MS+0.05mg/L 2,4-D 的培养基中进行液体培养。20d 后,培养基中除去2,4-D,并在继代培养过程中先后加入5g/LPEG、2mg/LGA3,以实现体细胞胚胎的诱导分化及成熟。最后将成熟体胚转入琼脂固化培养基1/2MS 中,实现植株再生。2、对新疆雪莲体细胞胚诱导分化及成熟的条件进行了优化,实现了新疆雪莲体细胞胚胎的萌发与成苗。并在体胚发育后期引入干化法处理成熟体胚,有效地提高了新疆雪莲体细胞胚的萌发率和成苗率,成苗率可达50%。3、 新疆雪莲体细胞胚多发生于胚性愈伤组织表面,少数发生于胚性愈伤组织的内部。体细胞胚胎形态发生经历了与合子胚相似的阶段,即球形胚-心形胚-鱼雷胚-子叶胚,最后发育成再生植株。体胚发育是不同步的,在同一块胚性愈伤组织上有处于不同发育阶段的体细胞胚。4、 新疆雪莲体细胞胚胎形态建成过程中同工酶酶谱的研究表明,POD 和EST同工酶的谱带都随着体细胞胚的发育而增多,并在不同发育阶段有特征谱带出现,可作为新疆雪莲体细胞胚胎发生的生化标记。5、 新疆雪莲体细胞胚胎形态建成过程中SDS-PAGE 图谱表明,非胚性愈伤组织的蛋白质含量较少,蛋白表达较弱;分子量为25KD、45KD 和91KD 的蛋白是球形胚期所产生的特征蛋白;而14.3KD 的蛋白条带是器官发生所特有的。

公开日期2014-08-20
源URL[http://ir.xjipc.cas.cn/handle/365002/3499]  
专题新疆理化技术研究所_资源化学研究室
推荐引用方式
GB/T 7714
贾莉芳. 新疆雪莲体胚诱导及成苗方法研究[D]. 中国科学院新疆理化技术研究所. 中国科学院研究生院. 2007.

入库方式: OAI收割

来源:新疆理化技术研究所

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