以天山雪莲花药为材料，系统研究了其愈伤诱导与再生体系建立的过程，对花药培养阶段的影响因素进行了探讨，并对天山雪莲和莴苣原生质体分离的条件进行了优化，在此基础上对天山雪莲与莴苣原生质体进行融合，为天山雪莲新种质选育奠定了基础，实验结果如下 1. 天山雪莲花药培养最适宜的花期是花蕾期，比盛花期诱导率高，且诱导出的愈伤组织质量好。在进行低温预处理7天后的诱导率较好，褐变率较低，综合效果最好。天山雪莲花药培养MS培养基附加激素组合2,4-D 0.5mg/L+6-BA 1mg/L诱导天山雪莲花药愈伤的效果最好，诱导率达到34%，显著高于其他组合。 2. 天山雪莲种子最佳消毒处理为75% C2H5OH处理50s ,0.5% HgC12处理6min, 15%H2O2处理30min，无菌水冲洗6次，发芽率和污染率分别为46.15%和45%。 3. 天山雪莲原生质体分离最优的方案为1.5%纤维素酶，1.0%果胶酶，0.2%离析酶，9%甘露醇，在25℃黑暗条件下振荡酶解12h的原生质体产量最高为9.073×105个•g-1 ，原生质体活力为87.95%，有活力的原生质体数目为7.98×105个•g-1。 4. 天山雪莲在继代培养10到12天左右进行酶解分离原生质体是最佳的。原生质体产量为8.89×105个•g-1 ，原生质体活力为87.1%。 5. 以莴苣无菌苗的幼叶为材料，研究了不同的分离材料、质壁分离时间、苗龄、酶液组合、酶解时间及酶液渗透压等对原生质体分离效果的影响。结果表明：幼叶在含有13%甘露醇的CPW溶液里质壁分离2h，获得的原生质体产量存活率均高于其他质壁分离时间，为5.04×105个•g-1；苗龄为20d的幼叶分离得到的原生质体质量高，原生质体呈圆形、内含物多、活力强；酶液组合为1.0%纤维素酶 + 0.2%离析酶，25℃黑暗条件下酶解12h可获得大量有较高活力的原生质体；酶解液中添加浓度为9%的甘露醇较适合原生质体分离。 6. PGE4000诱导天山雪莲与莴苣进行原生质体融合的最适浓度为30%，诱导融合率为8.3%。