据流行病学调查，心血管疾病随着人们生活水平的提高和生活方式的改 变，已经成为发达国家及部分发展中国家人民的主要杀手。心血管疾病主要病因是高血清总胆固醇，所以近年来人们都把降脂药的研 究和开发重点放到降低血清总胆固醇特别是低密度脂蛋白一胆固醇（LDL-C） 水平上，这些药能显著降低血清总胆固醇，防止及降低动脉粥样硬化和冠心病 发生，发展和死亡，对于预防和治疗心血管疾病功不可没。但它们通常只能减 少内源性胆固醇合成及降低家族性高胆固醇血症引起的冠心病的发展或恶化， 对于治疗外源性胆固醇增多引起的动脉粥样硬化，对于消除已进入巨噬细胞内 的胆固醇和抑制由此导致的动脉粥样硬化形成，使动脉粥样硬化血管回复正 常，则作用不大。近年来人们普遍注意到提高血浆高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-C）的含量可以有效改善这些问题。高密度脂蛋白一胆固醇（HDL-C） 的功能主要是胆固醇逆转运：把血液、外周组织中的胆固醇运送到肝脏去处理， 从而维持胆固醇水平恒定。提高血浆高密度脂蛋白一胆固醇（L-C）的含量 最重要是要提高载脂蛋白AI水平。另外大量资料证明，动脉粥样硬化的发生、发展与低密度脂蛋白氧化修饰 有关。最近的研究还发现，除从AS病变中能分离出的LDL有部分发生了氧化 修饰外，血管病变中通常含有抗氧化型LDL的抗体；血循环中存在的可与氧 化型LDL反应的抗体，其滴度与AS严重程度密切相关。抗脂质氧化药物可以 保护巨噬细胞免受脂质过氧化损伤和防止低密度脂蛋白氧化所导致的泡沫样 变，并能防止和减轻动脉粥样硬化形成。本论文根据以上降脂和脂质氧化机理，建立新一代降脂药和抗脂质氧化药 物筛选的方法，为中药现代化服务。本论文主要目的：建立载脂蛋白AI作为靶标，用MW-ELISA进行检测的 新一代降脂药筛选方法以及基于巨噬细胞吞噬氧化低密度脂蛋白的抗脂质氧 化药物的筛选方法。本论文方法：通过离体培养的人肝癌细胞HepG2（该细胞体外仍保持ApoAI 以及其他载脂蛋白的分泌能力），建立微波一酶联免疫吸附法（MW-ELISA），分析几种传统药物提取物对HePG2细胞分泌APOAI的影响，旨在建立起一种 高通量筛选降脂药的方法；为建立抗脂质氧化药筛选模型，首先分离提取人血 中低密度脂蛋白一胆固醇，利用Cu＋2氧化修饰低密度脂蛋白一胆固醇，产生过氧 化脂质，建立小鼠腹腔巨噬细胞吞噬氧化低密度脂蛋白过氧化脂质的实验模型， 检测细胞分泌脂质过氧化活性中间物丙二醛（MDA）的水平和该系统超氧化 物歧化酶（SOD）活力，通过药物干预前后，丙二醛水平和超氧化物歧化酶活 力变化，筛选具有抗脂质氧化潜力的药物。 在验证两种筛选模型的可行性时，选用已经在传统验方或动物实验模型上 有确切降脂或抗脂质氧化作用的多种中药材（泽泻、虎杖，郁金，山碴、马齿 芡、绞股蓝）提取物，希望既能考证两种筛选模型的可行性，又可进一步验证 这些药物及其有效成分的临床作用。本论文的结论：实验结果证明泽泻、绞股蓝、山植、郁金的提取物在我们 的降脂药筛选模型上具有相对明显的提高APoAI表达的作用，而绞股蓝、马 齿觉，虎杖、山植等的提取物在抗脂质氧化模型上确实具有明显的抗氧化作用， 实验发现不同的调脂药物（liporegulators）在我们的降脂和抗脂质氧化模型上 有不同的作用机制，本课题建立的方法可以作为降脂药和抗脂质氧化药物筛选的一种简单方法。