驱虫斑鸠菊有效组分的制备工艺优化及其质量标准研究
文献类型:学位论文
作者 | 祖力皮牙•买买提 |
答辩日期 | 2019-05-27 |
授予单位 | 中国科学院大学 |
授予地点 | 北京 |
导师 | 阿吉艾克拜尔·艾萨 |
关键词 | 驱虫斑鸠菊 指纹图谱 制备工艺 质量标准 |
学位名称 | 博士 |
学位专业 | 有机化学 |
英文摘要 | 驱虫斑鸠菊,Vernonia anthelmintica (L.) Willd. 是菊科斑鸠菊属植物。据《维吾尔药材标准》(1993) 第一版记载,驱虫斑鸠菊的成熟果实是该植物主要的药用部分,具有止痛、驱虫、消肿、散寒等作用,多用于医治肝病、湿寒性胃痛、白癜风等病症。由驱虫斑鸠菊药材提取精制的注射液,在临床上主要用于治疗白癜风,且具有一定的抗癌作用,研究还显示其有抗高血脂、糖尿病等功效。前期对驱虫斑鸠菊研究表明:该植物的主要化学成分是咖啡酰基奎宁酸类、倍半萜类、黄酮类、甾醇类和挥发油类等成分。本课题选择驱虫斑鸠菊种子作为研究对象,开展了药材质量标准研究,建立了药材薄层色谱指纹图谱、高效液相色谱指纹图谱,分析了高效液相色谱指纹图谱主成分对指纹图谱的贡献率,并使用 LC-QTOF-MS 方法解析了药材中的 14 个化合物;优化了驱虫斑鸠菊的抗白癜风的有效部位制备工艺、建立了有效组分中 5 个主成分的 HPLC 检测方法、定量分析其含量,利用波谱法鉴定了其中11个化合物的结构,为开发 5 类新药奠定基础。其具体研究结果如下:1. 驱虫斑鸠菊药材质量标准研究基于高效薄层色谱技术鉴别 (HPTLC) 方法,建立了药材薄层指纹图谱,定性分析了 3, 4-O-双咖啡酰基奎宁酸、3, 5-O-双咖啡酰基奎宁酸、4, 5- O-双咖啡酰基奎宁酸、斑鸠菊大苦素和 vernodalinol 五种成分;采用高效液相色谱技术建立药材 HPLC 指纹图谱,使用 ?中药色谱指纹图谱相似度评价系统? 软件对不同批次的驱虫斑鸠菊药材进行了相似评价,确认了 19 个共同特征峰;分别运用 SPSS25.0 及 SIMCA13 统计软件,把 19 个共同特征峰作为变量,进行聚类分析和主成分分析;建立了斑鸠菊大苦素、vernodalinol、3, 4-O-二咖啡酰基奎宁酸、3, 5-O-二咖啡酰基奎宁酸和 4, 5-O-二咖啡酰基奎宁酸的定量测定方法;发现不同产地和品种的驱虫斑鸠菊药材品质存在一定的差异,为驱虫斑鸠菊药材和提取物为原料的新药研发制定了采购标准。为进一步阐明药材的化学组成,采用高效液相色谱-质谱联用 (LC-QTOF-MS) 技术,对驱虫斑鸠菊药材提取物的主成分和微量成分进行了分析,鉴定了 14 个化合物。高效薄层鉴别法 (HPTLC) 体外抗氧化实验显示,结果表明驱虫斑鸠菊药材提取物具有清除自由基 (DPPH·和ABTS* +)活性。2. 驱虫斑鸠菊有效组分的富集工艺优化及质量标准研究以三种咖啡酰基奎宁酸、两种倍半萜含量及出膏率作为指标,采用单因素实验和响应面法,对驱虫斑鸠菊有效组分的提取工艺进行优化。确定了驱虫斑鸠菊有效组分的最佳提取工艺条件为:料液比为 1:12,乙醇浓度为 80 %,在 80 ℃下进行回流提取 2 次,每次 3小时,合并滤液。该方法操作简便、工艺稳定可靠。在提取工艺的基础上,采用静态吸附实验筛选出 HPD300 型大孔吸附树脂为最佳吸附填料,并通过考察上样液浓度、上样流速、最大上样量、除杂水的体积和洗脱乙醇浓度及用量等工艺参数,确定了驱虫斑鸠菊有效组分的富集纯化工艺:上样液的生药材浓度为 0.1 g/mL,上样体积量为 4 BV,以 2 BV/h 流速进行吸附,纯化水除杂用量为 3 BV,以 3 BV 的 60 % 乙醇进行洗脱,合并乙醇洗脱液,减压浓缩,浸膏真空干燥,粉碎过 90 目筛,得该药材的有效组分。同时,建立了驱虫斑鸠菊有效组分中 3, 4-O-双咖啡酰基奎宁酸、3, 5-O-双咖啡酰基奎宁酸、4, 5-O-双咖啡酰基奎宁酸、斑鸠菊大苦素和 Vernodalinol 五种成分定量测定方法,为驱虫斑鸠菊有效组分的质量控制提供了科学依据。3. 有效组分分离纯化采用现代分离技术对驱虫斑鸠菊有效组分进一步进行分离及纯化,共分离到了 11个化合物。通过氢谱 (1H-NMR)、碳谱 (13C NMR)、同核氢-氢相关 1H-1H COSY、异核多键相关 (HMBC)、异核单量子相关谱 (HSQC) 等波谱分析技术,鉴定了其结构。其中选择该植物中含量较丰富的三个倍半萜化合物进行测试 B16 细胞的体外抑制活性,结果表明这三个倍半萜类化合物具有显著的促进 B16 细胞黑色素合成作用。 |
页码 | 145 |
源URL | [http://ir.xjipc.cas.cn/handle/365002/6025] ![]() |
专题 | 新疆理化技术研究所_资源化学研究室 |
推荐引用方式 GB/T 7714 | 祖力皮牙•买买提. 驱虫斑鸠菊有效组分的制备工艺优化及其质量标准研究[D]. 北京. 中国科学院大学. 2019. |
入库方式: OAI收割
来源:新疆理化技术研究所
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