本发明涉及一种桦剥管菌中三萜类化合物及其制备方法，该化合物以桦剥管菌药材为原料，用溶剂提取，溶剂萃取，通过正相和反相硅胶柱色谱法、或葡聚糖凝胶LH‑20柱色谱法以及半制备高效液相色谱等三种或四种方式进行分离，采取薄层色谱和高效液相色谱法检测分析，得到3个新的三萜类化合物，经过波谱数据分析确定了它们的结构。其中化合物1为3,4‑开环‑24‑甲基羊毛甾烷‑4(28),8,24(31)‑三烯‑3,21‑二羧酸，化合物2为3,16‑二羰基‑羊毛甾烷‑7,9(11),24‑三烯‑21‑羧酸，化合物3为16α,25‑二羟基‑3‑羰基‑羊毛甾烷‑7,9(11),23‑三烯‑21‑羧酸。本发明对所得到的化合物进行了体外细胞毒活性测定，实验结果表明：从桦剥管菌中分离得到的三萜类化合物有不同程度的细胞毒活性，可用于制备抗肿瘤药物。