本发明提供一种山莴苣苦素印迹整体柱的制备方法，该方法以少量的山莴苣苦素为模板分子，加入拥挤试剂聚苯乙烯，以四氢呋喃溶液做溶剂，以甲苯做致孔剂，再加入功能单体4‑乙烯基吡啶、交联剂二甲基丙烯酸乙二醇酯和引发剂偶氮二异丁腈，然后超声溶解除去溶解氧，在水浴中进行聚合反应，最后得到具有选择性的山莴苣苦素分子印迹整体柱。本发明所述方法模板消耗量少，大大地降低了山莴苣苦素的印迹成本。在不锈钢柱管 (100 mm×4.6 mm) 中成功合成了山莴苣苦素印迹整体柱，以及空白对照柱并进行色谱性能优化。实验结果表明，印迹因子最高可达2.20。该方法制备简单，且高分子聚合物耐用性好，为山莴苣苦素的分离纯化提供了一条新路径。